上转磷光免疫层析检测肠出血性大肠杆菌O157-中国食品卫生杂志.PDFVIP

上转磷光免疫层析检测肠出血性大肠杆菌 O157 ———王 　静 　周 　蕾 　李 　伟等 — 4 1 — 论著 上转磷光免疫层析检测肠出血性大肠杆菌 O157 1 1 1 1 1 2 2 王 　静 　周 　蕾 　李 　伟 　胡孔新 　陈维娜 　闫中强 　杨瑞馥 ( 1. 中国检验检疫科学研究院卫生检疫研究所 ,北京 　100025 ; 2 . 军事医学科学院微生物流行病研究所 ,北京 　100071) 摘 　要 : 目的　建立一种肠出血性大肠杆菌 O157 的上转磷光免疫层析快速检测方法 。方法 　利用上转换磷光标 记和双抗体夹心免疫层析技术检测大肠杆菌 O157 ,评价了该法的敏感性和特异性 ,并用于模拟污染食品样品的检 测 。结果 　该法能在 40 min 内完成检测 ,应用于不同的肠杆菌科细菌如其他大肠杆菌 、沙门菌 、志贺菌 、变形杆菌 、 产气肠杆菌 、枸橼酸杆菌 、沙雷菌 、耶尔森菌以及葡萄球菌 、副溶血弧菌 、单增李斯特菌等 23 种 28 株常见细菌 ,未发 现有交叉反应 ,检测灵敏度为 5 ×103 CFUml ,每次最低可检测 500 个细菌 ,对奶粉 、咖啡粉 、饼干 、蛋糕 、绿豆糕 、果 冻 、燕窝、果汁等样品中的人工染菌均可检测 ,最低检测浓度为 5 ×103 CFUml 。结论 　肠出血性大肠杆菌 O157 上 转磷光免疫层析方法简便快速 ,特异性和灵敏性好 ,适用于现场的快速检测 。 关键词 :大肠杆菌 O157 ; 发光 ; 上转换发光材料 ; 免疫学技术 Development of UCPimmunochromatography Test for Rapid Detection of E . coli O157 WAN G Jing , ZHOU Lei , L I Wei , HU Kongxin , CHEN Weina , YAN Zhongqiang , YAN G Ruifu ( Institute of Health Quarantine , Chinese Academy of Inspection and Quarantine , Beij ing 100025 , China) Abstract : Objective 　To develop a method for rapid detection of Enterohemorrhagic E . coli O157 ( EHEC O157) on the spot . Method 　An UpConverting Phosphor (UCP ) immunochromatography test ( ICT) based on doubleantibody sandwich assay was developed for detection of EHEC O157 . The sensitivity and specificity of the method were evaluated. The feasibility of screening the bacteria in food samples were evaluated by different food samples artificially contaminated with EHEC O157 ∶H7 , including milk , starch , coffee , biscuit , cake , j uice , etc . Results 　Typical analysis time was less than 40 minutes per sample . The