马桑内酯对大鼠海马神经元钠电流的影响-神经病学专业毕业论文.docxVIP

声 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外 论文中不包含其它人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四 川大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作过 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢 意。 本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的 论文成果归四川大学所有，特此声明。 申请人： 弘勤 指导刻币：团如 四川大学七年制学生学位论文马桑内酯对大鼠海马神经元 四川大学七年制学生学位论文 马桑内酯对大鼠海马神经元 钠电流的影响 研究生：张勤 导师：周东教授 摘要 目的：马桑内酯(CoriariaLatcon，CL)是从植物马桑中提取的一种 快速、有效的致痫剂，其建立的癫痫模型可以表现出多种发作形式，并 具有一定的耐药性。但其作用机制尚未完全清楚。本实验旨在研究CL 对急性分离的SD大鼠海马神经元钠离子电流的影响，并探讨其意义。 方法：用胰蛋白酶消化加吹打的方法急性分离SD大鼠(出生后7．14天) 海马神经细胞，并用银染法对所分离的细胞进行验证。在膜片钳的全细 胞模式下，对细胞膜上钠离子通道的电生理活动进行记录。所得电流经 过膜片钳放大器(Axopatch 200B)放大，滤波(1KHz)后，输入计算机， 用pCLAMP8．1软件系统(Axon Instnunents)进行数据采集与分析。同时研 究20p l／ml和40p 1／ml两个浓度的CL对峰值钠电流以及钠通道电压依 赖性激活的影响。采用同一细胞加用CL前后自身比较以及不同浓度组 之间比较的方法，对各组数据用SPSSll．0进行t检验或单因素方差分析， 实验结果以“均数±标准差”(夏is)的形式表示，以P0．05为具有统 l 四川大学七年制学生学位论文计学差异。结果：银染法证实分离所得的海马细胞是神经元。其细胞膜 四川大学七年制学生学位论文 计学差异。结果：银染法证实分离所得的海马细胞是神经元。其细胞膜 上可以记录到内向的钠电流和外向的钾电流，离子通道的活性具有电压 依赖性。该钠电流快速激活后快速失活，对河豚毒素(TTx)敏感。给 以20 u 1／ml，40 u l／ml的CL三分钟后均可以不同程度地使峰值钠电流的 幅度增加(分别为17．32+8．52％，和37．98+4．9l％)；与对照组(3．16 ±3．65％)相比，40u l／ml(Pn01)较20u Yml(PO．05)的作用更明显。 两个浓度的CL使钠电流的电流一电压曲线(I-V曲线)下移，但对钠离 子通道的电压依赖性激活特性没有明显影响。结论：①急性分离的大鼠 海马神经元，经CL作用后，其瞬时内向钠电流增加；该作用可能是浓 度依赖的。②CL使钠电流增加可能并不是通过影响钠离子通道的激活特 性而实现的。@CL使钠电流增大的作用可以增加海马神经元的兴奋性 这可能是CL致痫过程的重要环节之一。 关键词：马桑内酯海马神经元钠电流膜片钳技术癫痫 2 璺型查兰主兰型兰生兰焦堡塞——The 璺型查兰主兰型兰生兰焦堡塞—— The effects of Coriaria Lactone Oft the sodium current of actuely isolated rat hippocampal neurons Graduate：ZhangQin Tutor：ProL ZhouDong Abstract Objective：Coriaria Lactone(CL)is made from the active parts of the plant Loranthus on Coriaria sinica Maxim，a medical herb． It can induce different seizure types in animal models quickly and efficiently．some of which are pharmacoresistant models．However， the mechanism underlying its epileptogenesis hasn’t been completely understood．In the present study，we try to find Out the effects of Coriaria Lactone on the acutely isolated rat hippooampat neurons and its significance．Methods：Sprague—Dawley Rat(post natal days 7 to 14)hippocampal neuron