毛壳菌生物杀菌剂剂型的研究-生物学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Classified Index: Q939.9 U.D.C: 579 Dissertation for the Master’s Degree in Science RESEARCH OF CHAETOMIUM BIOCIDE FORMULATIONS Candidate： Liu AiLong Supervisor： Prof. Song JinZhu Academic Degree Applied for： Master of Science Speciality： Biology Affiliation： School of Life Science and Technology Date of Defence： June, 2014 Degree-Conferring-Institution： Harbin Institute of Technology 哈尔 哈尔滨工业大学理学硕士学位论文 摘 要 毛壳菌是防治许多植物病害的重要生物防治菌，虽然具有良好的防治效果， 但毛壳菌生物活性容易受一些物理因素的影响。自然界中例如风、雨等因素能 够影响毛壳菌在植物表面的附生能力，使毛壳菌不易在植物上定殖产孢；阳光 中的紫外线能够杀伤毛壳菌孢子，使其丧失生物活性；环境中复杂因素会使生 防活性物质氧化降解，这些因素都会降低毛壳菌生防效果的发挥。 为了找到适合毛壳菌杀菌剂的剂型，保护毛壳菌的孢子活性，延长毛壳菌 活性有效期，本实验首先对毛壳菌生长特性进行研究，结果发现：毛壳菌在 28 ℃环境下生长最为旺盛，菌落直径增长速率为 1.2 cm/d，第 3-4 天开始产子 囊果，生长 10-12 天产子囊果完全，成熟子囊果的大小在 200-300 μm 之间，毛 壳菌孢子存在于子囊果中。采用平板固体发酵生产毛壳菌孢子，制得的新鲜毛 壳菌孢子萌发率在 65%左右。 本实验分别采用复凝聚法和挤压法制备毛壳菌微胶囊菌剂，通过复凝聚法 制得的微胶囊直径在 3 μm 左右，包囊率为 69%左右；挤压法制得的海藻酸钠微 胶囊直径在 3 mm 左右，包囊率在 90%以上，通过 6 个月的萌发测试，发现以 微胶囊为单位的萌发率保持在 100%。基于挤压法原理，研制出小批量微胶囊 菌剂生产器，包括：压力罐、原料罐、分压系统、下料口、固定池 5 个部分， 16 个下料口，单次原料装载量达到 1500 mL，极大地节省生产时间。 为了增强微胶囊对毛壳菌孢子的保护性能，将抗紫外剂荧光素钠按浓度 0.5 μg/mL 加入到微胶囊中制成抗紫外型生物杀菌剂；将 PDA 培养基加入到微 胶囊中制得全营养型生物杀菌剂，解决了紫外线和土壤中营养缺乏对孢子萌发 的影响，通过抗紫外实验发现：微胶囊内部孢子萌发率并没有随着紫外线处理 时间的增长而降低，萌发率保持在 65%左右，说明微胶囊对毛壳菌孢子具有一 定得保护作用。 为了验证毛壳菌生物杀菌剂的抑菌效果，实验选用西红柿镰刀菌、核盘菌、 立枯丝核菌作为病原菌进行对峙实验，通过试验可以观察到微胶囊菌剂的抑菌 效果并没有降低，最终确定微胶囊为杀菌剂剂型。 关键词：微生物农药；毛壳菌杀菌剂；挤压法；微胶囊 -I- Abstract Chaetomium can antagonize many plant pathogens, but the biological activity of Chaetomium can be vulnerably effected by some physical factors. Natural factors such as wind, rain could affect the ability of Chaetomium adherence on plant surface, so Chaetomium is difficult to grow and produce spores on plants; Chaetomium’s spores can be killed by the suns ultraviolet rays, and loss the biological activity ; On the other hand, some unfavorable factors in the environment will degrade active substances of biocontrol, These factors will reduce biocontrol effect of Chaetomium. In order to find a