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- 2019-05-09 发布于福建
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血清碱性磷酸酶活性测定第一组
血清碱性磷酸酶活性测定;酶活力测定与酶法分析;影响酶促反应速度的因素包括底物浓度、酶浓度、ph值、温度、激活剂、抑制剂等。
酶活力单位指:在特定条件下1分钟能将1微摩尔底物转化为底物所需酶量,或转化底物中1微摩尔的有关基团的酶数。
酶的比活力:单位质量酶蛋白或单位体积酶制剂所含有酶活力单位数。
方法:
1.终止测定法(定时法或终点法)
2.动力学分析法(连续监测法或速率法)
3.物质含量的测定方法
;酶法分析
!指应用酶作为工具定量测定某种物质含量的分析方法。
(一)单酶反应定量法
1、直接测定底物的含量
2、由辅酶变化量测定底物量
(二)偶联酶反应定量法
E1 E2
A B C
;酶活力测定和酶法分析在医学上的应用;实验目的;
实验原理
在PH10 环境中,ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠,苯酚与4-氨基安替比林反应生成色素原,该色素原经铁氰化钾氧化生成红色醌亚衍生物。测定红色物质的吸光度就可以计算酶活性的大小。
反应式如下:磷酸苯二钠+H2O——苯酚+磷酸氢二钠
苯酚+4-氨基安替比林——红色醌亚胺衍生物
;实验器材和试剂:
(一)器材:5ml移液管,1ml移液管,100或200ul微量可调式移液器,721E分光光度计,1cm比色皿,37℃ 恒温水浴
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