慢性间歇性低压低氧抗IgA肾病作用的研究-生理学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要1 英文摘要5 英文缩写10 研究论文 慢性间歇性低压低氧抗IgA肾病作用的研究 引言 11 第一部分 IgA 肾病大鼠模型的建立 前言 13 材料与方法14 结果19 附图21 讨论33 小结35 参考文献36 第二部分 5000 米海拔慢性间歇性低压低氧的抗 IgA 肾病作用 前言 39 材料与方法41 结果44 附图46 讨论59 小结61 参考文献62 第三部分 3000 米海拔慢性间歇性低压低氧的抗 IgA 肾病作用 前言 64 材料与方法66 结果69 附图71 讨论84 小结86 参考文献87 结论89 综述 IgA 肾病发病机制的研究进展 90 致谢103 个人简历104 中 中 文 摘 要 PAGE 10万方数据 PAGE 10 万方数据 慢性间歇性低压低氧抗 IgA 肾病作用的研究 摘 要 近年来大量研究表明，慢性间歇性低压低氧（chronic intermittent hypobaric hypoxia，CIHH）对人体免疫异常性疾病具有改善作用，可促进 变态反应性疾病患者免疫功能的稳定和恢复，对儿童支气管哮喘、成人过 敏性皮炎及自身免疫性甲状腺炎等具有缓解甚至治愈作用。我室的研究显 示，CIHH 可对抗急性低氧所致的免疫功能失调，有效预防大鼠胶原诱导 性关节炎的发生，减轻其关节组织滑膜炎症反应和病理损伤，具有免疫调 节作用。基于以上动物和人体的实验研究都已证实 CIHH 具有调节机体免 疫功能的作用，可能对机体的免疫相关性损伤具有治疗和保护作用。 IgA肾病（IgA nephropathy，IgAN）是最常见的肾小球疾病。本病在 亚洲和太平洋地区高发，在我国其发病率约占原发性肾小球疾病的30%。 IgAN的发病机制尚未完全阐明，现有资料表明其发病与先天或获得性免 疫调节异常有关。由于病毒、细菌等对呼吸道或消化道的刺激，使粘膜IgA 合成增多。IgA或含IgA的免疫复合物在系膜区沉积，引起系膜细胞增殖， 造成肾小球炎性损伤，是一种典型的自身免疫性慢性疾病。IgAN时，B 淋巴细胞活化因子、IL-4水平异常升高，这些细胞因子均参与IgAN的发病 及进展过程。由于发病机制复杂，目前尚没有针对IgAN的特异性治疗措 施。如何早期干预治疗是目前IgAN治疗研究的热点和焦点。 本研究旨在通过建立IgAN动物模型、给予CIHH处理，利用功能学、 形态学和分子生物学等方法，从动物整体、离体组织及细胞不同水平，系 统动态地观察CIHH处理对IgA肾病的保护作用，并探讨其可能机制。研究 分为以下个三部分：（1）建立IgA肾病大鼠模型，动态观测建模过程中， 动物的肾脏功能和形态学改变，综合评估模型的可靠性；（2）明确模拟 5000米海拔CIHH对IgAN的作用及其可能机制；（3）明确模拟3000米海 拔CIHH对IgAN的作用及其可能机制。 第一部分 IgAN 大鼠模型的建立 目的：建立并全面评估大鼠IgAN模型的可靠性和稳定性。 方法：健康雄性Wistar大鼠60只，随机分为对照组（Control组，n=30） 和模型组（IgAN组，n=30）。采用牛血清白蛋白（BSA）+蓖麻油+四氯 化碳（CCl4）+脂多糖（LPS）的复合造模方法建立实验性IgAN大鼠模型。 BSA 400mg/kg隔天灌胃，连续8周；CCl4 0.1ml+蓖麻油0.3ml皮下注射，每 周1次，连续8周；第6周和第8周尾静脉注射脂多糖（LPS）0.05mg。Control 组以4 ml/kg蒸馏水代替牛血清白蛋白（BSA），用0.4毫升蓖麻油取代蓖 麻油和CCl4，采用生理盐水代替LPS，给药方法与IgAN组相同。建模过程 中应用ELISA、免疫荧光染色等方法动态观测动物血、尿生化指标，血清 IgA水平，肾组织形态学改变及IgA沉积等情况。 结果：1 IgAN组大鼠自实验第4周出现血尿和蛋白尿，血尿素氮及肌 酐水平升高，至第8周显著高于Control组（P0.05）。IgAN大鼠临床表现 与人类IgAN相似。 2 IgAN组大鼠自实验第4周血清IgA水平升高，肾组织IgA免疫荧光检 测显示肾小球系膜区IgA沉积，至第8周显著高于同时间点的Control组 （P0.05）。IgAN大鼠免疫异常与人类IgAN相似。 3 IgAN组大鼠自实验第4周出现肾小球系膜区肿胀等炎性改变，系膜 细胞增生，双重免疫荧光实验证实至第8周系膜细胞显著增生。IgAN大鼠 肾组织病理改变与人类IgAN相似。 小结：应用复合方法建立的IgAN大鼠模型从临床表现、肾脏病理学 改变、可能发病机制等方面均可部分模拟人类I