梅岭霉素产生菌原生质体抗药性选育及检测方法的研究-土壤学专业毕业论文.docxVIP

江西农业大学硕jj学位论文：梅岭霉素产生菌原生质体抗药性选育及梭测方法的研究文 江西农业大学硕jj学位论文：梅岭霉素产生菌原生质体抗药性选育及梭测方法的研究 文 献综述 (Literature) O．引言(Introductiorl) 自从青霉素和链霉素相继发现以来，由于抗生素的卓越疗效和经济价值，以抗生素 为主的微生物发酵工业迅猛发展，生产了许多极有价值的药物和化学制剂。促进发酵工 业生产迅速发展，除了发酵工艺和设备改进以外，最主要的因素是由于遗传育种给发酵 工业生产不断提供了各种类型的突变菌株．应用选育出的突变型高产菌株生产抗生素， 可以带来巨大的经济效益，这一点在氨基酸、酶制剂、维生素、有机酸等生产领域也表 现的十分明显。无疑，重要微生物的遗传育种涉及～系列微生物潜在资源的开发和应用， 对国民经济的贡献是巨大的。 1．抗生素产生菌的推理选育(RatiOilal SeIectiOR of the Antibiotics-Yi eId strai ns) 1．1推理选育的概念 诱变与筛选是菌种选育的两个主要环节，前者是指菌株诱发突变，后者是对突变型 筛选与检出。对突变株的筛选大多数可分为两种方法：一是随机筛选，二是推理筛选。 经验式的随机筛选方式往往必须筛选上大量的菌株才能找到一株较好的变异株，该法存 在着工作量大、效率低等缺点[“。而推理筛选方法能使大量的分离菌株很快地过筛，去 除低产菌株，便于检出各种优良菌株。因此，未来抗生素筛选和菌株改良技术将不使用 经验性的随机方法，而使用科学上更为严密的推理方法。 工业菌株改良的总目标是提高产生菌的生产力，降低生产成本，以获得巨大的经济 效益。传统的菌种筛选一般采用随机大量分离筛选和直接测定效价，尽管取得很大成功 和在应用方面得到很大效益。可是，随机筛选毕竟是一种费时费力的方法，为要发现极 少数优良菌株需要筛选大量分离株，这就耗费大量人力、设备和资金，不符合上述的目 标。近年来，随着生物化学和遗传学研究的进展，人们逐渐放弃效率较低的、传统的菌 种选育方法一随机选育，而采用效率较高的推理选育方法。 推理选育方法就是应用已知的生物化学和遗传学原理，根据己知或可能的抗生素生 江西农业大学硕J：学位论文：梅岭霉素产生菌原生质体抗药性选育及检测方法的研究物合成途径的调控机制和产物的分子结构．设计出一些筛选方法，定向地选出某些类型 江西农业大学硕J：学位论文：梅岭霉素产生菌原生质体抗药性选育及检测方法的研究 物合成途径的调控机制和产物的分子结构．设计出一些筛选方法，定向地选出某些类型 的突变株。这种筛选方法的实质是建立在产生菌的生物化学和遗传学原理的基础上，针 对代谢产物的生物合成途径采取理性或半理性的方法进行菌种选育，这种方法可以大大 减少筛选的盲目性，可提高筛选效率，缩短筛选周期。这在抗生素的菌种选育中已有较 多成功的研究报道[2l。【71。且袁丽容等对随机筛选与理一『生化筛选作了比较的研究报道表明 理性化筛选不但正变异频率高于随机筛选，且正变幅度也大于随机筛选f8J，故认为理性 化筛选远优于随机筛选。 1．2抗药性突变型 抗药性突变型菌株即指对一种药物或几种药物来说，接触一般以使其野生型菌株致 死(或生长被抑制)的浓度而仍能正常生长的菌体，这种变异菌株一般在不含这种药物 的培养基上连续传代时仍不改变它的抗药性，具有一定的稳定性【9J。对自身产生的抗生 素或前体类似物的耐药突变，与抗生素合成的关系比较密切，因而采用抗药性菌株对其 抗生素的产量的提高可能有利，金志华【10l等根据抗生素抗性与产量之间的相关性而采用 螺旋霉素浓度平板理性化筛选螺旋霉素链霉菌高产菌株获得成功。微生物对所产生抗生 素耐药性的提高，可能同时发生对其反馈调节的缓解，这是由于抗生素产生菌发酵过程 中在抗生素积累超过一定浓度会导致产生菌自杀 】，产生菌通过反馈抑制和反馈阻碍来 限制抗生素的过量积累，进行代谢的自我调节，而保护菌株自身旧。由于抗药性基因发 生突变时，其抗生素合成的相关基因也相应发生突变，其分子机理是抗生素产生菌的抗 性基因与抗生素合成的结构基因和调控基因紧密连锁【¨1．因而各基因之间易发生共突变 (Co—mutation)|。4】，从而解除抗生素的反馈抑制和反馈阻碍，因此产生菌可以产生更多的 抗生素．Aurodox产生菌的选种即是一个成功的例子【15l，此外在次甲基霉素A的产尘菌 天蓝色链霉菌A3(2)[16l。链霉菌产生菌(Strbikiniensis)【。7l及另外一些氮基糖苷类抗生 素的产生菌【吲中均发现抗生素合成基因与其耐药的基因有密切连锁的关系。 抗药rf生突变型有的能抗一种药物．有的能同时抗多种药物。最近对几种产抗生素的 菌种测定结果表明，产抗生素的菌株对不同药物的抗性突变和对其自身抗生素产量变化