氯原酸对白血病细胞的抑制作用及其作用机制的研究-内科学(血液病学)专业毕业论文.docxVIP

浙江大学硕士学位论文对象与方法 浙江大学硕士学位论文 对象与方法 一、研究对象 人白血病细胞系：KGl、I(562和Jurkat三株细胞系，其中KGl为急性原始粒细胞白 血病细胞系，K562为慢性粒细胞白血病细胞系，Jurkat为急性淋巴细胞白血病细胞系 (ALL)。均为本实验室常规培养。 二、研究方法 1．细胞接种：采用处于对数生长期的细胞，按细胞密度8X 103／孔分别加入96孔 细胞培养板中。 2．药物作用： 每孔分别加入梯度浓度的药物，Na-氯原酸和(或)小檗胺，不加 药物为阴性对照，每组设3个平行孔。37。C，5％C02，饱和湿度下培养48小时。 3．MTr作用：每孔加入209lMTT，继续培养4小时。 4．测吸光度：离心，弃上清，每孑L加入200I_tl--rv基亚枫，水平摇床振荡5分钟， 用全自动酶标光度计在470rim处测吸光度。 5．在计算机中使用Microsoft Office Excel计算抑制率及50％细胞生长抑制浓度， 并以药物浓度为横坐标，活细胞数为纵坐标作图，观察药物对细胞增殖抑制的情况。 结果 -20C保存的不同浓度的氯原酸钠对K562细胞有明显的增殖抑制作用，其作用强 度呈现浓度依赖性，48 d,NN 50％细胞生长抑制浓度(IC50)值为24．21099／ml，但是 对KGl、Jurkat均无明显得增殖抑制作用。4℃保存的不同浓度的氯原酸钠对K562细 胞具有更强的增殖抑制作用，48 d,a州J IC50值为13．177 Hg／ml，同时对Jurkat细胞也 有较明显的增殖抑制作用，48小时的IC50值为13．177 gg／ml，作用强度呈现浓度依赖 2 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 性，但对KGl细胞仍无作用。 小檗胺单独作用对K562细胞有明显的增殖抑制作用，其作用强度呈现浓度依赖 性。48小时的IC50值为6．080pg／ml。 1399／ml(IC50)的氯原酸钠与不同浓度的小檗胺联合作用对K562细胞的增殖抑 制作用略强于小檗胺单独作用于K562细胞。 699／mt(I(250)的小檗胺与不同浓度的氯原酸钠联合作用对K562细胞的增殖抑制 作用明显强于氯原酸钠单独作用于K562细胞。 结论 1．．20℃避光保存的氯原酸钠可以选择性抑制ber-abl阳性的CML细胞系K562细 胞的增殖。 2．4C保存的氯原酸钠对bcr-abl阳性的CML细胞系K562的增殖抑制作用增强， 并且对ber-abl阴性的Jurkat细胞亦具有增殖抑制作用。 3．氯原酸钠与小檗胺具有协同抑制CML白血病细胞K562增殖的作用。 关键词 自血病细胞；氯原酸钠；小檗胺；联合作用 浙江大学硕士学位论文A 浙江大学硕士学位论文 A research on effects and mechanisms of Chlorogenic acid inhibiting leukemic cells Department MedicineCnaematology) Medical School of Zhejiang University 2005 graduate Gu Ying Supervisor Professor Xu Rongzhen ABSTRACT Leukemia is the most common malignant neoplasm of hematopoietic system． nowadays，chemical therapy and haemopoietic stem cell transplantation are main measures of leukemia therapy．But，chemical therapy Can only gain transient relief and 5-year disease free survival rate of haemopoietic stem cell transplantation is 35％一50％．In addition，because of the constraint of stem cell donor,only a few people Can receive HSCT HSCT exsits many chancinesses associated with transplantation and recurrence．For the past many years，hematologists have been searching for medicines to cure leukemia worldwild．In a recent study．a Bcr-Abl