热补针法对RA模型家兔尿液代谢物谱表达调节的研究.doc

热补针法对RA 模型家兔尿液代谢物谱表达调节的研究 前 言 类风湿关节炎（RA）是一种系统性、进行性自身免疫疾病，以对称性多关节病变为 主要特征，RA 可发生在任何年龄，女性多于男性，本病在全球发病率为 0.5%～1%，我 国为 0.2%～0.4%，致残率高达 50%，成为全球导致劳动能力丧失的第 31 位疾病，世界 卫生组织已将其定为医学界难治性疾病，有学者称其为“不死的癌症”[1-2]。 RA 目前尚无根治之法，研究发现 RA 机体内发生了代谢物谱的变化[3]，针灸治疗 RA 的机理与调节细胞因子、补体、神经递质等有关，而这些物质的变化必然引起其下游相 关物质代谢的变化，说明了针灸治疗 RA 的机理与调节体内代谢紊乱相关。导师前期研 究发现[4-7]，在中枢及外周镇痛机理以及持续镇痛后效应方面，热补针法对 RA 的治疗作 用具有特异性。但这些研究只是从镇痛角度进行了初步研究，未能体现针灸多靶点、多 途径、多层次、类似于网络结构的作用特点，缺乏对机体产生的全部生物信息的综合分 析，尚不能完全揭示热补针法治疗 RA 的作用机理。代谢组学作为新兴的、前沿性学科， 有着独特的优势，已受到多个国家专家、学者的普遍关注，广泛应用于众多领域，代谢 组学能够反映整体变化，可能比较适合于中医及针灸多靶点、多途径、多系统的研究。 因此，运用先进的代谢组学技术，进一步深入揭示热补针法对 RA 的作用机制，将为热 补针法治疗 RA 提供理论依据，对促进中医针灸理论在临床中的应用和发展具有重要的 现实意义。 本研究拟以卵蛋白诱导的RA家兔为载体，借助代谢组学等系统生物学的最新研究方 法和技术，从尿液的特征代谢物谱的改变途径探讨RA发病机制以及热补针法治疗RA的作 用机制和特异性效应，为针灸临床治疗RA选择最佳的针刺手法提供实验依据。 5 万方数据 热补针法对RA 模型家兔尿液代谢物谱表达调节的研究 第一部分 立题依据 1 RA 概述 RA 是一种系统性、进行性自身免疫疾病，以对称性多关节病变为主要特征，最常累 及到双手关节、腕关节、肘关节、膝关节、踝关节、足关节等，受累关节病情逐步加重， 部分关节发生强直、畸形，从而导致功能丧失，不同程度的残疾。本病的系统性表现在 RA可引起多器官，多系统发生病变，可出现发热、贫血、类风湿结节、类风湿血管炎、 心脏、胸肺部病变、消化、神经系统疾病及淀粉样病变、眼部疾病等[8]。本病成为全球 导致劳动能力丧失的第 31 位疾病，世界卫生组织已将其定为医学界难治性疾病[1]。RA 可发生在任何年龄，女性多于男性，本病我国发病率为 0.2%～0.4%，致残率高达 50%[2]。 RA 发病机制 RA 发病机制至今不明确，本病的发生可能基于以下机制： 分子模拟学说 可以促使 RA 发病的微生物，例如 EB 病毒、大肠杆菌、结核杆菌等，其蛋白中有段 相同的序列 QK/RRAA，而某些蛋白上也有该序列，当上述病原微生物进入机体之后， QK/RRAA 片段诱发机体产生抗体，此抗体不仅能和外源抗原结合，产生免疫复合物，还 能同自身某些蛋白等相结合，从而引发自身免疫反应[8]。 模糊识别学说 T 细胞在和 HLA-抗原复合物相结合时，多个 HLA 表型可以识别同一种抗原，不同的 抗原又可以和同一 HLA 相结合，HLA 与抗原的结合相对“宽松”，但依然可以被 T 细胞所 识别，因此，一些多肽和蛋白抗原可以借助自己的一段共同序列和抗原结合槽口袋 4 相 结合，这种特异或/和非特异（模糊）的抗原结合促使机体发生自身免疫反应[8]。 2 RA 机体发生代谢物谱的变化 近年来，随着对 RA 研究的不断深入，发现在 RA 机体内发生了代谢物谱的变化[3]。 炎症在 RA 患者的骨质破坏中起着至关重要的作用，如 TLR 配体及细胞因子可下调 TREM-2 等共刺激分子的表达，诱导 M-CSF 受体 c-Fms 失活，导致 RANK 转录减少；诱导 转录因子受体如 IRF8 的产生等等，这些机制以互补、协同的方式参与炎症部位的骨诱 裂[9]。研究表明[10]，活动期 RA 体内 IL-32 异常增多，并且能引起 TTNF-alpha 等促炎细 胞因子的产生。其在 RA 患者机体中可激活血管内皮细胞，增强内皮细胞中黏附分子的 表达，使结缔组织细胞和多形核细胞产生小分子炎性介质，并可通过刺激成纤维细胞增 6 万方数据 热补针法对RA 模型家兔尿液代谢物谱表达调节的研究 殖，刺激成纤维细胞和软骨细胞产生胶原酶及前列腺素，从而导致骨及软骨的破坏[11]。 研究发现[11-12]，在 RA 患者关节中，IL-15 显著升高，升高的 IL-15 可通过诱导 IL-17 而 刺激滑膜细胞，使之释放 IL-6、IL-8、GM_CSF、PGE 等各种炎症介质