赖氨酰氧化酶在大鼠急性脊髓损伤后细胞内表达的实验性研究-外科学专业毕业论文.docxVIP

The Study On The Intracellular Expression Of LOX After Acute Spinal Cord Injury In Rats Dissertation Submitted to North China University of Science and Technology in partial fulfillment of the requirement for the degree of Master of Medicine by Liang Zhenxing (Surgery) Supervisor: Professor BaiJunQing Professor ChengAiGuo June, 2015 独 创 性 说 明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含 为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了 明确的说明并表示了谢意。 论文作者签名： 日期：2015 年 6 月 8 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保 留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论 文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检 索和交流。 作者及导师同意论文公开及网上交流的时间： √□ 自授予学位之日起； □ 自 年 月 日起。 作者签名： 导师签名： 签字日期：2015 年 6 月 8 日 签字日期：2015 年 6 月 8 日 摘要 摘 要 华北 华北理工大学硕士学位论文 摘 要 目的 本研究旨在利用自制改良的 Allen 式打击装置，探索赖氨酰氧化酶（LOX） 在大鼠急性脊髓挫伤修复过程中是否存在表达及其意义。 方法 1）利用自制改良式 Allen 氏打击装置将 12 只雌性 SD 大鼠随机分为 A、 B 、 C 三 组 ， 每 组 4 只 ， 分 别 以 A 组 25g.cm （ 10g×2.5 cm ） 、 B 组 35g.cm （10g×3.5 cm）、C 组 45g.cm（10g×4.5 cm）势能撞击脊髓，通过肉眼观察和 HE 染色观察，确定脊髓挫伤模型的势能。2）48 只成年健康雌性 SD 大鼠随机分为 A、B、C、D 四组，A 组为β-氨基丙腈组（β-Aminopropionitrile，BAPN，一种 LOX 抑制剂），B 组为氯化钴组（CoCl2 ，一种 LOX 促进剂），C 组为单纯损伤 组（injury），D 组为正常对照组（sham）。在采用 Allen’s 方法成功地复制大鼠 急性脊髓挫伤模型的基础上，在损伤后不同时间段（1、3、7、14 和 30d）切取实 验脊髓段制成石蜡切片，然后进行免疫组化研究。 结果 1）25g.cm 的势能可以复制成大鼠脊髓挫伤模型。2）LOX 在损伤脊髓和正 常脊髓组织中主要表达在细胞质中，阳性着色呈棕黄色细颗粒状形态，弥漫性或小 片状分布。形态呈圆形、椭圆形、三角形、不规则形不等。3）LOX 在各组脊髓组 织中 LOX 的表达平均阳性率分别为 A 组 30.03%、B 组 73.96%、C 组 42.35%、D 组 5.54%，差异具有统计学意义（P0.05）。正常脊髓内的 LOX 阳性细胞很少， A、B、C 三组 LOX 阳性细胞经时变化走势是相同的，均表现为 1d 开始增加，3d 表达到达高峰，7d 开始明显下降。A、B、C 三组与 D 组比较以及三组间相互比 较，均具有统计学意义（P0.05）。 结论 1）自制改良的 Allen 氏打击法既可以理想的脊髓损伤模型应具备的条件， 又能够防止操作过章程中因大鼠可能出现移动而导致重锤撞击偏移目的区。25g.cm 势能致伤类型为脊髓挫伤模型。2）正常的脊髓组织中也有少量的 LOX 阳性细胞 表达，SCI 后 1d 则会有明显地升高，在脊髓损伤后，BAPN 能够通过抑制胶原和 弹性蛋白间的共价交联形成从而起到抑制 LOX 的表达，CoCl2 能够通过诱发和加 重缺氧状态而促进 LOX 的表达。3）由此可以推测，LOX 在神经细胞内以无活性 形式存在，当细胞内底物水平大量增加时，LOX 分泌则会增加。这种 LOX 表达 及活性增加有可能会促进胶原纤维的交叉连接以及胞外基质重塑。 - I - - -