桑枝皮醇溶物的有效成分及其体外生物活性-生物物理专业毕业论文.docxVIP

苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定， 苏州大学学位论文使用授权声明 本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定， 即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸 质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献 信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、 中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子 文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索。 涉密论文口 本学位论文属 在——年一月解密后适用本规定。 非涉密论文∥ 论文作者签名：室出 日 期： 导师签名：驾盟日期： 桑枝皮醇溶物的有效成分及其体外生物活性 桑枝皮醇溶物的有效成分及其体外生物活性 中文提要 中文提要 本实验以湖桑32桑树枝条皮为材料，用醇水溶液浸提方法制备桑枝皮醇溶物 (MBBEE)。采用有机溶剂萃取和大孔树脂吸附两种分离方法对桑枝皮醇溶物有效 成份进行分离与纯化，并对MBBEE及其各个组分进行总黄酮、总酚、总糖、总 单宁酸及游离氨基酸含量的测定及体外生物活性探究。MBBEE经有机溶剂萃取可 分成石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相和剩余水相五个部分，其中正丁 醇相和水相为主要组份，其对DPPH自由基清除能力的抑制中值(IC50)分别为 O．16 m∥mL和O．10 m∥mL；正丁醇相对酪氨酸酶的抑制作用远远高于其它萃取组 分，IC50值达到5．2 p∥mL，而水相对Oc．葡萄糖苷酶的抑制活性最强，其IC50值为 2．5“∥mL。MBBEE经D101大孔树脂吸附分离后，获得占质量比为44％穿透相、 34％水洗脱相、21％醇水相(30％乙醇溶液洗脱部分)和2％乙醇相(无水乙醇溶 液洗脱部分)四个部分。应用高效液相色谱法对MBBEE及其四个部分游离糖类、 1．脱氧野尻霉素(DNJ)、槲皮素、芦丁及白藜芦醇等重要成份含量进行了测定。 穿透相和水洗脱相的游离氨基酸含量分别达到14568 p∥g和17902 pg儋，其中丫一 氨基丁酸的含量分别为580 pg儋和518 p∥g，果糖含量分别为177．30 m∥g和129．15 m∥g，具有仅．葡萄糖酶抑制活性的DNJ含量分别为1．9 m∥g和O．76 m∥g，槲皮素 含量分别为46．05 m∥g和56．03 mg儋。与MBBEE原有仪一葡萄糖苷酶抑制活性(IC50 值为2．75“咖L)相比，经大孔树脂吸附后这种抑制活性主要集中在穿透相和水 洗脱相，其IC50值分别为1．7肛咖L和2．3 p∥mL。醇水相中糖类含量晟高的是鼠 李糖，为233．95 m∥g；槲皮素及芦丁的含量分别为69．52 m∥g、62．19 m∥g；且醇 水相对酪氨酸酶的抑制作用及对DPPH自由基的清除能力都远远高于MBBEE及 其它组分，IC50值分别达到0．25¨g／mL和142“∥mL。本实验还采用半制备HPLC 法对醇水相中主要成分(F2色谱峰)进行了分离、纯化和制备，经LC．MS、UV 光谱、荧光光谱、1H NMR和13C NMR波谱分析，鉴定该成分为氧化白藜芦醇 ．4．O．D．D．吡喃葡萄糖．3’一O．p．D．吡哺葡萄糖苷，即桑皮苷A(Mulben．oside A)。活 性分析表明桑枝皮醇提物及其醇水相对DPPH自由基的清除能力及酪氨酸酶的抑 制活性主要来自桑皮苷A，其IC50分别为35．33 pmol／L和0．07 nmol／L。 中文提要 中文提要 桑枝皮醇溶物的有效成分及其体外生物活性 实验结果表明，桑枝皮醇溶物含有包括芦丁、槲皮素、DNJ、白藜芦醇以及Y． 氨基丁酸等在内的多种生物活性物质，其总量近八成的D101树脂穿透相和水洗脱 相具有很强的Ⅸ．葡萄糖苷酶抑制活性，而占总量二成的醇水相部分具有很强的抑 制酪氨酸酶的活性，其主要成分为桑皮苷A。所以，桑枝皮醇溶物不仅可以作为 降血糖的生物药物广泛应用于糖尿病及其迸发症的治疗，而且在高级美白化妆品 等方面也有潜在的应用价值。 关键词：桑枝皮醇溶物、大孑L树脂、0L．糖苷酶抑制活性、酪氨酸酶抑制活性、 DPPH自由基清除能力、1．DNJ、桑皮苷A 作 者：李琳 指导老师：张雨青(研究员) remaining remaining water)．The n—Bu0H and Res were the m旬or行actions，and their inhibition rates(IC5