溃结灵对UC大鼠Th17细胞分化的调节机制研究-中西医结合基础专业毕业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 IL．21、ROIⅫ、STAT3、IL．17mRNA的影响，并探讨相关作用机制。方法：采用SD雄性大鼠并制作由三硝基苯磺酸TNBS诱导的UC模型，随 IL．21、ROIⅫ、STAT3、IL．17mRNA的影响，并探讨相关作用机制。 方法：采用SD雄性大鼠并制作由三硝基苯磺酸TNBS诱导的UC模型，随 机分为UC模型组，正常组，SASP组，溃结灵高、中、低剂组。溃结灵高、中、 低剂量和SASP对UC大鼠进行干预，药物治疗结束后处死，刮取黏膜，采用实 时定量荧光PCR方法检测结肠黏膜中TGF．[31、IL．6、IL．21、STAT3、ROIⅫ、 IL．17111I悄A的表达。 结果：溃结灵高剂组和SASP组结肠黏膜中TGF．Blrr心A的表达明显高于 模型组(尸O．05)；模型组结肠黏膜中IL．6mRNA明显高于正常组(PO．01)， 溃结灵高、中剂组和SASP组的基因表达低于模型组(PO．01)；模型组结肠黏 膜中IL．21mRNA明显高于正常组(P0．01)，溃结灵高、中剂组和SASP组的 基因表达低于模型组(P0．01或P0．05)；模型组结肠黏膜中STAT3mRNA明 显高于正常组(PO．01)，溃结灵高、中剂组和SASP组的基因表达低于模型组 (尸0。01或P0．05)；模型组结肠黏膜中RORg明显高于正常组(尸O．01)， 溃结灵高、中剂组和SASP组的基因表达低于模型组(氏O．01)；模型组结肠黏 膜中IL．17mRNA明显高于正常组(P如．01)，溃结灵高、中剂组和SASP组的 基因表达低于模型组(P0．01或P0．05)； 2．溃结灵对UC大鼠结肠黏膜中ROR／t、STAT3蛋白表达的影响 STAT3可调节RORyt的表达，进而抑制Thl7细胞的分化，ROIⅫ的表达 亦随之降低。STAT3为胞质着色，主要表达于黏膜固有层的单个核细胞，中性粒 细胞和黏膜上皮细胞中也可见表达，RORg主要表达于炎症细胞胞核和胞浆中。 本实验通过采用免疫组化的方法对其蛋白进行定位和定量分析。 方法：造模、分组、给药，同实验一，采用中性福尔马林固定结肠组织， 制作病理切片，采用免疫组化的方法观察各组大鼠结肠中RORlrt、STAT3蛋白 的表达。 结果：模型组结肠黏膜中R0脚蛋白表达高于正常组(尸0．01)，溃结灵 高、中、低剂组和SASP组的蛋白表达低于模型组(尸0．01或P0．05)；模型 组结肠黏膜中STAT3蛋白表达高于正常组(P0．01)，溃结灵高、中、低剂组 和SASP组的蛋白表达低于模型组(PO．01或P0．05)。 3．溃结灵对UC大鼠结肠黏膜中IL．2l蛋白表达的影响 Thl7细胞大量表达IL．21，实验表明IL．21能显著促进Thl7细胞分化，IL．2l 能取代IL．6的作用和TGF．D1诱导Thl7细胞分化。本实验通过溃结灵对UC大 鼠结肠黏膜中IL一21蛋白表达的影响，并探讨其相关作用机制。 方法：造模、分组、给药，取材同实验一，采用酶联免疫吸附(ELISA)试 剂盒检测结肠黏膜中IL．21的蛋白表达。 结果：模型组结肠黏膜中IL．21的蛋白表达明显高于正常组(P0．05)，溃 结灵高、中剂组和SASP组的蛋白表达低于模型组(尸0．05)。 结灵高、中剂组和SASP组的蛋白表达低于模型组(尸0．05)。 结论： 针对研究结果进行分析，可得：UC模型大鼠中，炎症因子IL．6、IL．21等 炎症因子大量表达，激活信号通路关键因子STAT3，从而通过RORTt来促进 Thl7细胞分化并分泌炎症因子IL．17。经过溃结灵干预后，TGF．131的表达上调， IL一6、IL．21等炎症因子表达受到抑制，导致RORTt的表达下调，进一步抑制 STAT3表达，从而抑制Thl7分化和IL．17的分泌。提示溃结灵通过调节上述的 因子来影响Thl7细胞的分化，从而恢复Thl7／Treg平衡，最终达到治疗UC的 目的。 关键词：溃结灵；溃疡性结肠炎；TGF．131；IL．6；IL．21；RORyt；STAT3；IL．17 IV The The research on the mechan i sm of Ku i J i e I i ng regu l at i ng Thl 7 d i fferent i at i on on UC mode I SpeciaIty：Basi S of combination of traditional Chinese mediCiRe and western dediCiRe Author：Zifeng LiU Tutor： Oun Du Abstract Object ive T helper cells play an significant role in th