课件：临床微生物样本采集规范上传SIFIC.pptVIP

Thanks for your listening THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * * * * * * * * 关于咳痰标本 在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1 ～ 2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导; 无痰可用3％ ～ 5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰； 咳痰标本不合格，退检吗？ 如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，白细胞小于10个，应不做或仅在特殊要求时做培养。 如做培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显”。 下呼吸道标本采集方法（1） 1 自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃ 3％ ～ 5％盐水溶液，使痰液易于排出。 2 支气管镜采集法： 经支气管镜直接吸引 支气管肺泡灌洗 防污染样本毛刷 下呼吸道标本采集方法（2） 3 胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。 4 气管穿刺法：主要用于厌氧菌培养 5 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。 痰培养的送检次数 对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2 ～ 3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检； 怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。 痰培养的运送和保存 所有病人的下呼吸道标本应在采集后立即送至微生物室，并于1小时内接种 如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放置时间不可超过24h。运输时勿置于冰块中 被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。 室温下放置1h会降低肺炎链球菌、流感嗜血杆菌的分离率而定植于上呼吸道的非致病菌则会过度生长 四、大便培养标本采集规范 #1 #2 接种血平皿，麦康凯平皿，Hektoen或DCA，若怀疑弧菌则还接种TCBS平皿。37 ° C 空气孵育48h #3 粪便标本采集后30分钟内进行接种或置于cary-blair运输培养基中 #4 ③粪便培养 重要的病原菌：沙门菌、志贺菌、弯曲杆菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、产毒性大肠杆菌难辨梭菌（在常规的实验室可能检测不出） 选择血性或脓性的部分进行接种 血平皿上氧化酶阳性的革兰阴性杆菌需进一步鉴定 将菌落接种TCBS或含0-6％盐浓度的肉汤中。 麦康凯、HEK或DCA平皿上不利用乳糖的革兰阴性杆菌需进一步鉴定。 氧化酶阳性、湿润的米色菌落 革兰染色显示弯曲或螺旋形的杆菌 弯曲杆菌属 Campy琼脂 #6 ? Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution #5 将菌落接种至Campy琼脂或使用滤纸法。微需氧环境下37-42° C 孵育 72 h ③ 大便培养标本采集规范（1） 1.采集时间：腹泻患者应在用药前、急性期采集；沙门菌感染、肠热症应在2周内采；厌氧菌出现症状即采集。 2.采集方法： ①直肠拭子法：用无菌拭子蘸生理盐水湿润，由肛门插入约 6～7cm，轻轻在直肠内旋动取出大便少许，放入无菌便盒中，加盖封口送检。 ②自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏液的部位的粪便2-3克，如液状粪便取絮状物盛于无菌的、密封的、不吸水的、容器内或直接盛于增菌液或保存液中。 大便培养标本采集规范（2） 3.? 注意事项： ⑴虽然粪便标本本身含很多细菌但也要用无菌容器。 ⑵在患者病情许可的条件下应在用药前采集标本。 ⑶应床边接种或置输送培养基送检。 ⑷厌氧细菌（难辩梭菌）培养的标本应尽量减少与空气接触。 五、脑脊液标本采集 ②脑脊液（CSF)培养 主要病原菌：B群β溶血链球菌（新生儿），流感嗜血杆菌（2月-2岁儿童），肺炎链球菌，脑膜炎奈瑟氏菌 最少1ml，最佳5ml 医生通过无菌皮肤穿刺采集脑脊液（腰椎穿刺）于无菌管中。第二管和第三管用于微生物学检测。 # 1 1500×g离心15分钟（可能的话） # 2 # 3 用吸管吸去 上清，留下 1cc的脑脊液沉淀 注意：不要倾倒 # 4 滴一滴沉淀 于巧克力平皿和 血平皿 上下吸取 10次以上 混匀沉淀 # 5 CO2中孵育72小时 # 6 将一大滴沉淀 滴在玻片上。 不要涂开。 自然干燥并进行革兰染色。 如见到大量多形核白细胞则 强烈支持感染 # 7 ? Ellen Jo Baron 2007;