课件：肿瘤基因治疗aa.pptVIP

THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 反义治疗并不像刚开始人们所想像的那么简单，目前还有许多关键性问题有待去解决，如生物学稳定性，药物的释放系统，以及由序列特异性和非特异性所引起的作用包括毒副作用等。应用反义技术进行肿瘤基因治疗最常用的靶基因有Ha-ras、c-myc、c-fos、c-jum、c-erbB2等癌基因以及编码端粒酶基因，或端粒酶的RNA部分。 第五节 抗肿瘤血管生成的基因治疗 ? 肿瘤的生长、转移与新生血管的形成密切相关,由于肿瘤的血管生成受到血管生长因子、血管生长抑制因子以及其它的因子的共同调控,因此通过阻断促血管生长因子作用或者强化血管生长抑制因子的表达均可达到治疗的目的。 一、阻断血管生长因子的作用 主要是采用反义DNA、中和性抗体、受体酪氨酸激酶的抑制剂以及核酶等。 用腺病毒载体介导的VEGF 的拮抗物输入鼠卵巢癌抑制VEGF 的活性； 利用含有VEGF cDNA 的腺病毒载体转染乳腺癌细胞,用以拮抗VEGF 的促血管生成作用； 用抗VEGF 的核酶抑制VEGF 的表达,使卵巢癌生长及血管生成减少的报告。 针对其它的血管生成因子的治疗, 如bFGF , 缺氧诱导因子( HIF) , EGF , PDGF ,PDECGF ,IGF ,Ets-1 ,HGF 等的因子的治疗。 二、上调血管生长抑制因子 用重组血管抑素cDNA 输入消化道肿瘤可取得较好的治疗效果, 用编码内皮抑素的重组腺病毒载体可抑制内皮细胞迁移和VEGF 介导的血管生成, 病毒载体介导的重组编码PF4 的反义基因显示出抗鳞癌血管生长的作用。 三、抑制细胞外基质和基膜降解以及抑制内皮细胞特异性粘附分子的作用 用腺病毒载体介导的T1MP-1 基因转染肿瘤细胞,瘤细胞产生的T1MP-1 抑制了MMP-2 ,MMP-9 的活性,使内皮细胞的迁移受到抑制。Gondi 等采用双顺反子逆转录病毒载体介导的反义uPAR 和uPA 治疗胶质瘤,明显抑制了肿瘤的血管生成。 第五节 、加大肿瘤细胞与正常细胞的天然差别 —— 自杀基因治疗 自杀基因（suicide gene）治疗思路就是人为地改变肿瘤细胞的状态，将一些“自杀基因”(TK基因、CD基因和较新的细胞色素p450-2B1基因)转导入肿瘤细胞中，这些基因所表达的产物能将原先对细胞无毒或相对低毒的物质转变为细胞毒性物质，而引起到杀伤细胞的作用。 自杀基因治疗对免疫功能的激发作用 ①诱导炎症细胞浸润（T细胞、单核细胞、中性粒细胞）； ②诱导细胞因子的分泌（IL-1、TNF-α、IL-1α、IL-6、mRNA在治疗后第2天开始表达,而IFN-γ、GM-CSF在治疗后第2天开始表达，到治疗后第4天仍有表达，其中以TNF-γ表达升高最明显）。 第六节 提高化疗效应——耐药基因治疗 肿瘤化疗中最难处理的问题之一 就是出现瘤细胞对许多常用化疗药物产生抗药性和交叉抗药性，有些肿瘤开始敏感，但经过一段时间后出现耐药性,这种耐药性常表现为肿瘤细胞对多种结构不同、作用靶位不同、作用方式不同的抗肿瘤药物具有抵抗性,称为多药耐药(multidruge resistance,MDR)。 在肿瘤治疗中多数抗癌药物是促进细胞凋亡的，而癌细胞的耐药是化疗中最棘手的问题。在报道中将BCl-2转入癌细胞则癌细胞变为耐药，目前从凋亡角度来研究肿瘤的耐药性，可能找到新的解决方法。 第七节 　肿瘤基因治疗研究面临的主要问题? 基因治疗是21世纪治疗恶性肿瘤的重要手段。 一、基因导入的载体系统 目前所采用的载体主要分为转染性和转导性载体。 转染性载体是利用化学或物理方法增加细胞膜的通透性而将DNA 转染入细胞内,包括脂质体和基因枪等。 转导性载体则是利用病毒对细胞的天然亲和力把遗传物质引入宿主细胞。 转染的方法相对简易,抗原性弱但效率较低,而且基因表达的持久性不够。因此它在肿瘤基因治疗中的使用受到限制。转导法则效率高,作用持久,但抗原性较强,目前大多数基因治疗程序仍以病毒介导。逆转录病毒是目前最为成熟、运用最广的进行基因转移的载体系统。 二、基因治疗的靶向性策略 带有目的基因的载体如何到达“靶细胞”是肿瘤基因治疗的关键。只有提高基因转导的靶向性,才能实现治疗的针对性和安全性。 目前解决基因的靶向转移及表达有3 种策略 ⑴ 用基因工程手段改造基因载体,如改造逆转录病毒包装细胞中的原病毒env 序列,使所包装的重组病毒特异地识别位于靶细胞表面的抗原或受体决定簇; ⑵ 在体内基因传递系统中共价连接抗瘤抗体和肿瘤细胞特异受体的配基,使基因在类