利用EGCG分散制备纳米硒及其生物利用度的研究-茶学专业论文.docxVIP

独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作 及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包 含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材 料。与我 一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作 了明确的说明并表示谢意。 研究生签名讯树咐 时间 :-;.0 1] 年 6 月 l 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定， 即:学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借 阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文 。 同意安徽农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论 文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议〉 研究生签名 : 试问时 导师签名 : (1励和 时间 : 2013 年 6 月! 日 时间: 2013 年 6月 j 日 I I 摘 要 牛血清白蛋白分散的纳米硒 (BSA 纳米硒) 是一种生物利用度与有机硒，如甲基 硒代半胱氨酸 (Se-MSC) 与硒代蛋氨酸 (Se-Met) 相同，毒性较有机硒低的新型硒形 式。研究发现，褪黑激素，聚乙烯乙二醇，三磷酸腺苷，多糖等物质均可分散硒纳 米颗粒，但这些纳米硒研究中均未做其生物利用度的评价。绿茶中的主要功能性成 分表没食子儿茶素没食子酸酯 (EGCG)，可分散制备纳米金 (198AuNP-EGCG)，瘤内 注射 198AuNP-EGCG 后在小鼠体内取得靶向性治疗效果，未造成机体毒性，据称， 该效应涉及 EGCG 的专一性受体 67LR。碳纳米管可以在 EGCG 溶液中稳定分散， EGCG 分散的碳纳米管由于 EGCG 的给电子能力，表现出对活性氧的高敏感性。 已知 pH 对 EGCG 的质子化状态及相应的给电子能力有极大的影响。在强酸 pH 条件下，EGCG 的 3′, 4′, 4′′- 酚式羟基基团质子化，无给电子能力；在中性至碱性 pH 条件下，3′, 4′, 4′′- 酚式羟基基团去质子化形成酚阴离子，给电子能力增强。我们的 研究显示，在 pH 8 时，EGCG 能够有效控制形成 EGCG 纳米硒，而在 pH 1 时， EGCG 分散的硒纳米颗粒大量聚集，纳米特征消失。由此可见，EGCG 去质子化后 的酚阴离子形式在维持 EGCG 纳米硒稳定性上发挥着关键作用，质子化 EGCG 不能 维持纳米硒颗粒的稳定性，提示 EGCG 纳米硒的口服生物利用度会由于胃酸环境而 降低。之后利用缺硒动物模型评价 EGCG 纳米硒与同尺寸 BSA 纳米硒的生物利用 度，发现采用灌胃方式给药时，EGCG 纳米硒在在 80μg Se/kg 剂量下，EGCG 纳米 硒在提高肝与肾 GPx 活力水平，及肝中硒积累方面均不及 BSA 纳米硒 (p 0.01) ， 这说明 EGCG 纳米硒比 BSA 纳米硒口服生物利用度差；选择腹腔注射方式，即绕过 胃酸环境给药时，EGCG 纳米硒与 BSA 纳米硒生物利用度相同 (p 0.05)。由此可 知，不同分散剂制备的纳米硒即使尺寸相同，生物利用度也未必一定相同。 关键词：生物利用度，表没食子儿茶素没食子酸酯，纳米硒，质子化 II II Abstract Bovine serum albumin dispersed selenium nanoparticles (B-Se) has been demonstrated to be a novel selenium source with reduced toxicity but without compromised bioavailability relative to organic selenium compounds in use, such as methyl selenocysteine (Se-MSC) and selenomethionine (Se-Met). Thereafter, other substances such as melatonin, polyethylene glycol, adenosine triphosphate, and polysaccharides were found to be effective dispersers of selenium nanoparticles; however, in view of bioavailability in terms of elevating selenoenzyme activities, none of these selenium nanoparticles was evaluated.