山茶组织培养的初步分析-植物学·植物细胞工程专业论文.docxVIP

⑧ ⑧ 硕士学位论文 MASTER’S+r}jf：SIS 摘要 山茶是世界上三大饮料之～，又有重要的食用及医疗保健价值，具有重要 的经济意义。本文以山茶初春新生枝条的幼叶为外植体，采用不同的培养基， 探讨了不同的植物生长调节物质对愈伤组织的诱导和不同的理化因子对愈伤 组织的增殖效应。研究了在愈伤组织增殖过程中的生长周期以及生长周期中的 生理生化指标的变化。分析了在愈伤组织生长周期中山茶总黄酮、总皂甙和茶 多酚的含量变化，为山茶的进～步开发，细胞培养和次生物质的生产提供理论 和实验依据。 试验结果如下： 1．愈伤组织的诱导与增殖： ER培养基是山茶愈伤组织诱导与增值的最佳培养基。MS、N6、B5、三 种培养基也可以诱导出愈伤组织。 不同浓度、不同种类的植物生长调节物质对山茶的愈伤组织具有不同的诱 导效应。单因子以2，4-D2．0mg：L的效果最好。组合因子 NAAl．0m叽+6一BAl．0mg／L最好。 愈伤组织增殖的培养基也是ER培养基+NAAl．0rag／L+6一BAl．0mg／L为最 好。在愈伤组织增殖过程中，其生长周期为30天，生长曲线“s”形，基本上 可以分为三个时期即延迟期(0一一12天)、指数增长期(12--24天)、稳定期(24—30 天)。碳源以葡萄糖40mg／L为最佳。光照对愈伤组织的增殖有积极的作用。 用以防褐化时，活性炭不起作用，以O．5％的水解酪蛋白为好。 3．愈伤组织生长周期中生理生化指标的变化 可溶性蛋白的变化、过氧化物酶(POD)活性的变化、超氧化物歧化酶(SOD) 活性的变化均与生长周期密切相关。同时受光照条件的影响。 4．次生代谢物含量的变化 山茶总黄酮、总皂甙以及茶多酚的含量变化也与愈伤组织的生长状态有密 切的联系。次生代谢物的合成与积累与光照条件有一定的联系。愈伤组织次生 代谢物的积累主要塞细胞增长周期的稳定期。光照培养下，三种次生代谢物的 含量均高于暗培养。 关键词：愈伤组织 生长周期 山茶 生理生化指标 黄酮 皂甙 茶多酚 ⑧ ⑧ 硕士学位论文 ^nSr￡R’Stl|lESIS Abstract Camellia is one of three main drinks in the world．it also has great edmle and medical value．The paper reported something about it．111e callus was induced and proliferated using young leave as explant，which comes out at early spring．In this paper,the author discussed the induction effect and the proliferation effect by using different kinds of hormone and different physical—chemical factors．The growth circle and some physiology-biochemical indexes were illustrated．As the same time， the tendencies of flavonids，saponins and tea-polyphenols during growth circle are analysed，The paper provides scientific and experimental basis for cell culture and secondary metabolism matters yield． The results are following： 1．The effects of induction and the proliferation which mediums are applied different kinds of hormone or different concentration hormone are different． Medium ER is optimum for callus inducing and proliferation，but medium MS、B5，N6 also can be used to induce callus．In callus inducing，2,4一D2．0mg／L is the best of all single hormone，NAAl．0mg／L+6一BAI．0metE is the best of all combinedhormo