小麦高分子量谷蛋白新亚基因1D×5的克隆与分子标记.pdfVIP

小麦高分子量谷蛋白新亚基基因1Dx5’的克隆与分子标记 电泳图谱上就应该有6条HMW．GS带。但由于部分基因处于沉默或不表达状 态，大多情况下只能得到3～5条带。这主要是由于一些编码麦谷蛋白的基因的 表达发生了沉默所致。几乎所有的普通小麦都包含有1Bx，1Dx和1Dy的亚基， eta1．， 1983)。但是普通 同时，一些材料也包含有1By和／或lAx亚基(Payne 小麦中来自于1A的亚基通常只有一个，即lax型，而没有发现lay型亚基 (Lawrenceet a1．1981)。分子生物学方面的证据充分表明lAy基因确实存在于普 通小麦，但是由于基因结构上的一些变异，编码区出现了终止予，使得其成为假 et 基因(Fordeet a1．，1987)。如前所述，Glu-1的三个位点的 a1．，1985；Harberd 亚基都存在着多态性，其中Glu-B1位点变异程度最大，而Glu-A1位点变异程度 最小。尽管亚基的类型很多，但是亚基之间的组合数目是有限的。例如，7亚基 常与8或9亚基组合在一起。这是由于在同一座位上的两个亚基的基因是紧密连 锁的，在杂交中很难打破这种连锁关系而产生重组类型的组合。不同的亚基变异 类型和组合方式在小麦中出现的频率也存在很大的差异。 2．HMW麦谷蛋白亚基与小麦加工品质的关系 2．1HMW麦谷蛋白亚基与面筋弹性的关系 面筋弹性与小麦加工品质关系甚密。高分子量麦谷蛋白亚基结构上的许多特 性在决定面筋弹性方面有重要作用，可以从以下几个方面来解释它具有这种作用 的机理。首先，它有一段很长的中央重复结构域，该区域可以形成螺旋结构，而 螺旋具有延展性使高分子量麦谷蛋白亚基对变性作用有稳定性。高分子量麦谷蛋 白亚基与弹性有关的第二个方面是可用于形成分子间交联的半胱氨酸残基 (Cysteine)的分布和数量，这是因为交联度将决定面团弹性的性质，交联度低时， 面团的延伸性就会增加，随着交联度的提高，面团弹性就会增强。高分子量麦谷 蛋白的Cysteine残基主要位于分子的两个末端，这样就可以允许中央区域发生形 变和复原的反复变化。交联数目上的改变，将对HMW亚基多聚体的物理性质有 重要影响(Shewry，1992)。 2．2高分子量麦谷蛋白亚基对品质的贡献 Payne等人出色的工作，以及其他一些实验室的研究成果，已经使得依照对 2 第一章小麦I-I姗-GS与H姗一GS基因研究进展 品质的贡献对由GIu-A1，Glu．B1，Glu．DI所编码的主要亚基进行评分成为可能。 不同位点上的等位基因变异对面团和烘烤品质效应显著不同，现在公认Glu-D1 位点作用最大，且一般认为GIu．．『的3个不同位点对烘烤品质及多种面团强度 指标贡献大小顺序为：Glu．DIGIu-B1Glu一彳J(刘丽etal，2003)。如与1Dx2／3／4 一些亚基对，对其单个亚基的品质进行评分后发现：1Bx7较1Bx6好，1Bx8优 et eta1．1 a1． a1．1 987；Odenbach，W．，E1-S．Mallgoub．1988；Shewry992；LtiX．B．，et 2004。 3．HMW麦谷蛋白亚基的分子生物学研究 3．1HMW麦谷蛋白基因的研究 目前已经有一些高分子量麦谷蛋白亚基的基因得到了详尽的研究。大部分此 I 983)设计出2个寡核苷酸探针，从一个小麦的EcoR 根据文献(Thompson，1 Charon 32文库中筛选到一个新的高分子量麦谷蛋白亚基的基因，序列分析表明 Ax2*和Bx7的基因，并对其 白亚基的一段基因序列作探针，分离到了1By9， 作了基因序列的分析。也有人用高分子量麦谷蛋白亚基的cDNA作探针，然