辣椒CaYAB2基因的克隆与功能分析-生物学专业论文.docxVIP

重庆大学硕士学位 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 PAGE PAGE VI study the effect of CaYAB2 gene on development of pepper lateral organs. Keywords: CaYAB2 gene, Pepper, Expression patterns, Subcellular localization, Vector construction , 重庆大学硕士学位 重庆大学硕士学位论文 缩略词表 缩略词表 缩写 英文名称 中文名称 ZT Zeatin 玉米素 Amp Ampicillin 氨苄青霉素 IAA Indole-3-acetic-acid 吲哚乙酸 花椰菜花叶病毒 CaMV 35S Cauliflower mosaic virus 35S promoter 35S 启动子 cDNA Complementary DNA 互补 DNA DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 dATP/dTTP/dCTP/dGTP dNTP deoxynucleotide triphosphates 的混合物 SDS Sodium dodecyl sulfate 十二烷基磺酸钠 EB Ethidium bromide 溴化乙锭 E.coli Escherichia coli 大肠杆菌 rpm Rounds per minute 每分钟转速 EDTA Ethylene diamine tetracetic acid 乙二氨四乙酸 ddH2O Double distilled water 双蒸水 MS Murashige and skoog medium MS 培养基 5-溴-4 氯-3-吲哚- X-gal 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactoside IPTG Isopropyl-β-D-thiogalactoside β-D-半乳糖 异丙基-β-D-硫代 半乳糖苷 Kan Kanamycin 卡那霉素 LB Luria-bertani media LB 培养基 Tris Hydroxy-methyl-amino methane 三羟甲基氨基甲烷 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 RT-PCR Reverse transcription-polymerase chain Reaction 反转录-聚合酶链式反应 mRNA messenger RNA(ribonucleic acid) 信使核糖核酸 重庆大学硕士学位论 重庆大学硕士学位论文 目 录 目 录 中文摘要I 英文摘要 II 缩略词表IV 1 绪 论 1 1.1 叶原基的起始 1 1.2 极性建立 2 1.2.1 叶基－顶轴和中－侧轴的极性建成 2 1.2.2 叶近－远轴的极性建成 2 1.2.3 近－远轴面的调控基因 3 1.3 课题的意义、研究目的与内容 7 1.3.1 课题的研究意义 7 1.3.2 课题的研究目的、内容以及技术路线 7 1.3.3 创新点与拟解决的关键问题 8 2 CAYAB2 基因的克隆、表达模式与生物信息学分析 9 2.1 材料、试剂及仪器 9 2.1.1 材料 9 2.1.2 试剂 9 2.1.3 主要仪器设备 10 2.2 实验方法 11 2.2.1 辣椒材料收集 11 2.2.2 辣椒叶片总 RNA 的提取 11 2.2.3 RT-PCR 12 2.2.4 引物设计 13 2.2.5 PCR 扩增目的基因片段 13 2.2.6 PCR 产物的纯化 13 2.2.7 构建 pMD18-T-CaYAB2 重组质粒、转化以及鉴定 14 2.2.8 生物信息学分析 16 2.2.9 CaYAB2 基因表达模式分析 16 2.3 结果与分析 17 2.3.1 目的基因的克隆 17 2.3.2 CaYAB2 基因的生物信息学分析 20 2.3.3 CaYAB2 基因的表达模式分析 28 3 CAYAB2 基因的亚细胞定位研究 29 3.1 实验材料与设备 29 3.1.1 研究材料 29 3.1.2 常用分子生物学试剂和试剂盒 29 3.1.3 主要仪器设备 29 3.1.4 常用试剂及培养基的配制 29 3.2 实验方法 30 3.2.1 CaYAB2 亚细胞定位载体的构建 30 3.2.2 pCAMBIA1301-GFP-CaYAB2y 重组子转化农杆菌 EHA105 32 3.2.3 农杆菌 EHA105 介导的洋葱表皮细胞的转化 3