实验琼脂糖凝胶电泳的原理以及方案.pptVIP

;一、电泳方法的分类 ;按支持物的装置形式不同，区带电泳可为： 平板式电泳，支持物水平放置，是最常用的电泳方式； 垂直板式电泳，聚丙烯酰胺凝胶常做成垂直板式电泳； 垂直柱式电泳，聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳即属于此类； 连续液动电泳，首先应用于纸电泳，将滤纸垂直竖立，两边各放一电极，溶液自顶端向下流，与电泳方向垂直。;概念：以琼脂糖凝胶作支持体的电泳方式。; 天然琼脂(agar)是一种多聚糖，主要由琼脂糖(约占80%)及琼脂胶组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不带电荷。而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖，由于这些基团带有电荷，在电场作用下能产生较强的电渗现象，加之硫酸根可与某些蛋白质作用而影响电泳速度及分离效果。; 琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型凝胶。 ; 琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳，其优点如下： (1)琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需事先处理就可进行电泳。 (2)琼脂糖凝胶结构均匀，含水量大(约占98-99%)，近似自由电泳，样品扩散度较自由电泳 小，对样品吸附极微，因此电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好。 (3)琼脂糖透明无紫外吸收，电泳过程和结果可直接用紫外光灯监测及定量测定。 (4)电泳后区带易染色，样品易洗脱，便于定量测定。制成