第十二章蛋白质的生物合成翻译.ppt

非翻译区：调控其mRNA稳定性；控制mRNA亚细胞定位；突变可引起疾病的发生等。 * 中国古文：5言绝句，7言律诗；节奏、规律 * 我们平时做实验特别讨厌这种事情的发生，“致命的打击” * 欧洲的一个病人，正常情况下氨基酸这么排列，（缺失2个碱基），检查他的mRNA水平，发现少了一条带，编码血小板ADP受体P2Y12带没有了,血小板功能障碍。有一次在酒吧喝酒， * * 多数情况下，同义密码子的头两位碱基相同， * * * * * * * * * * * * * 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) 热休克蛋白属于应激反应性蛋白质，高温应激可诱导该蛋白质合成。热休克蛋白可促进需要折叠的多肽折叠为有天然空间构象的蛋白质。 热休克蛋白包括HSP70(Dna K)、HSP40(Dna J)和GrpE三族。 * 它有两个主要功能域： 一个是存在于N-端的高度保守的ATP酶结构域，能结合和水解ATP； 另一个是存在于C-端的多肽链结合结构域。蛋白质的折叠需要这两个结构域的相互作用。 大肠杆菌的HSP70 (Dna K) ATP酶 肽链结合结构域 H2N EEVD-COOH Grp E 结合部位 DnaJ/HSP40 结合部位 * 大肠杆菌中的HSP70 反应循环 * DnaJ与未折叠蛋白质结合， 将多肽导向DnaK-ATP复合物， 并与DnaK结合 DnaJ激活DnaK的ATP酶, 水解ATP生成ADP，产生 DnaJ-DnaK-ADP-多肽复合物 在Grp E作用下，ATP与ADP交换， 复合物解离，释放折叠蛋白质 二、蛋白质一级结构修饰主要是肽键水解和化学修饰 （一）肽链N-端和C-端有切除和化学修饰 （二）各种氨基酸残基可进行多种化学修饰 1．糖基化 2．羟基化 3．甲基化 4．磷酸化 5．二硫键形成 6．亲脂性修饰 * 三、空间结构修饰包括亚基聚合和辅基连接 结合蛋白质合成后都需要结合相应辅基，才能成为具有功能活性的天然蛋白质。 具有四级结构的蛋白质由两条以上的肽链通过非共价键聚合，形成寡聚体(oligomer)。 （一）通过非共价键亚基聚合形成具有四级结构的蛋白质 （二）辅基连接后形成完整的结合蛋白质 * 蛋白质的靶向输送 (protein targeting) 蛋白质合成后被定向输送到其发挥作用的靶位点的过程。 * 合成后蛋白质可被靶向输送至细胞特定部位 蛋白质在核糖体上合成后，定向输送到一个合适的部位才能行使各自的生物学功能。蛋白质的靶向输送与翻译后修饰过程同步进行。 蛋白质合成后的三种去向： 保留在胞液， 进入细胞器， 分泌到胞外。 * 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要是N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这类序列称为信号序列(signal sequence)。 蛋白质肽链的N-端有一长度为13-36个氨基酸残基的信号序列称为信号肽(signal peptide)。 信号序列是决定蛋白质靶向输送特性的最重要元件，提示指导蛋白质靶向输送的信息存在于蛋白质自身的一级结构中。 （一）靶向输送的蛋白质N-端存在信号序列 * N-端含1个或几个带正电荷的碱性氨基酸残基，如赖氨酸K、精氨酸R； 中段为疏水核心区，主要含疏水的中性氨基酸，如亮氨酸、异亮氨酸等； C-端加工区由一些极性相对较大、侧链较短的氨基酸（如甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸）组成，紧接着是被信号肽酶(signal peptidase)裂解的位点 。 信号肽有以下共性： * Günter Blobel （1936-） 1999年诺贝尔生理医学奖 “信号肽的发现” * 靶向输送到细胞核的蛋白质其多肽链内含有特异信号序列，称为核定位序列(nuclear localization sequence, NLS) 。 NLS为含4～8个氨基酸残基的短序列，富含带正电荷的赖氨酸、精氨酸和脯氨酸，可位于肽链的不同部位，而不只在N末端。 不同的NLS间未发现共有序列； 在蛋白质进核定位后，NLS不被切除。 核定位序列 * 信号肽引导分泌型蛋白质进入内质网 * （1）合成蛋白质信号肽 （2）核糖体-多肽-SRP复合物形成 （3）结合信号肽识别颗粒SRP受体 （4）新生蛋白质信号肽插入内质网膜 （5）转位进入内质网腔，信号肽被酶降解 （6）多肽链折叠 * J. Nanosci. Nanotechnol. 2010, 6534 NLS * 体内肿瘤细胞靶向快速输送抗癌药物及生物成像试剂的DNA纳米火车