四细胞化学染色.pptVIP

【正常血细胞染色反应】 1.单核细胞系统 原始单核细胞 分化差 阴性 分化好 阳性 幼稚及成熟单核细胞 阳性 被氟化钠抑制 2.粒细胞系统 原粒细胞阴性或弱阳性 以下阶段为弱阳性 3.淋巴细胞系统 多数阴性，少数弱阳性 不被氟化钠抑制 【临床意义】 急单 急粒 急性早幼粒 急粒单 急淋 α-NAE +++或 -或 ++ 阳性 -或+ ++++ 弱+ NaF 被抑制 不被 不被抑制 部分被抑制 抑制 部分未被抑制 主要用于鉴别急性白血病类型 五、 α-丁酸萘酚酯酶染色 2. 原理 细胞内的α-丁酸萘酚酯酶(α-NBE)在碱性条件下，将基质中的α-丁酸萘酚水解，产生α-萘酚，再与重氮盐偶联，生成不溶性的有色沉淀，定位于酶活性所在处。 α-丁酸萘酚酯酶 （细胞内） α-丁酸萘酚酯 （基质液中） α-萘酚 重氮盐 （坚牢蓝B） 胞浆不溶性灰黑色 或棕黑色沉淀 水解 【原理】 参考值 粒细胞系统：各阶段均阴性 单核细胞系统：原单阴性，余均阳性，但被氟化钠抑制 淋巴细胞系统：B淋巴细胞均阴性，余可阳性 其他细胞：可阳性，不被氟化钠抑制 5. 临床意义： 1）鉴别急性白血病类型： AMOL时，原始单核细胞可呈阳性反应，幼单核细胞和成熟单核细胞呈强阳性反应，但能被氟化钠抑制(抑制率在50%以上)；AML时，原始粒细胞一般呈阴性反应，少数呈阳性反应，但不被氟化钠抑制或仅部分轻度抑制；ALL时，原始淋巴细胞和幼淋巴细胞呈阴性反应，T-ALL原始淋巴细胞可呈阳性反应，但不被氟化钠抑制。 2）鉴别急性单核细胞白血病和组织细胞白血病：异常组织细胞可呈阳性反应，但此酶不能被氟化钠抑制；急单时，白血病细胞的阳性反应可被氟化钠抑制。 六、铁 染 色 （ferric stain） 正常人骨髓中的贮存铁存在的方式： 骨髓小粒中的含Fe血黄素 —骨髓单核-巨噬细胞内 （细胞外铁） 铁蛋白 —幼红细胞内（细胞内铁） 亚铁氰化钾 亚铁氰化铁 (蓝色沉淀在含Fe部位) 铁 ＋ 酸性环境 普鲁士蓝 反应 原理 【结果判断】 细胞外铁 低倍镜观察涂片尾部和骨髓小粒,细 胞外铁位于幼红细胞外或骨髓小粒巨噬 细胞浆内，呈蓝色颗粒状、小珠状或团 块状。 再用油镜判断阳性程度，根据铁量 多少分五级: （-） （+） （++） （+++） （++++） 细胞内铁 幼红细胞核染色为鲜红色,铁粒呈蓝绿色。 油镜下计数100个中幼红细胞和晚幼红细胞，记录胞浆中含有蓝色颗粒细胞的百分率。 根据细胞内铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况,将铁粒幼红细胞分为四型: Ⅰ型(1-2) Ⅱ型(3-5) Ⅲ型(6-10) Ⅳ型(11以上) 铁粒幼红细胞 胞质中出现蓝色铁颗粒 的幼红细胞。 环铁粒幼红细胞 幼红细胞胞质内蓝色铁 颗粒在6颗以上，并围绕 核周1/2以上者。 铁粒红细胞 成熟红细胞出现蓝色铁颗 粒。 1.细胞外铁 +～++，约2/3人为++，约1/3人为+。 2.细胞内铁 阳性率19%～44% Ⅰ型为主，少数为Ⅱ型（无环形铁粒幼红细胞和铁粒红细胞） 【参考值】 【临床意义】 1.诊断缺铁性贫血、指导铁剂治疗 　细胞内、外铁明显减低甚至消失，经铁剂 治疗有效后，其细胞外铁、内铁先后增多。 2.诊断铁粒幼细胞性贫血 铁粒幼红细胞、环形铁粒幼红细胞均增多，细胞外铁也常明显增多。 (与血红素合成有关的酶和辅酶缺乏或活性降低 铁利用障碍、血红素合成障碍、红细胞无效生成） 3.骨髓增生异常综合征（MDS） 伴环形铁粒幼红细胞增多的难治性贫血（RARS亚型），其环形铁粒幼红细胞大于0.15。 正常骨髓细胞各染色结果对比表 染色方法 红系 粒系 单核系 淋巴系 巨核系