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不锈钢膜乳化法制备PLGA微球初步探究和评价 ［摘要］目的：以水飞蓟宾药物为主药，利用不锈钢 膜制备粒径均一的聚乳酸-轻基乙酸共聚物(PLGA)微球。 方法：采用不锈钢膜乳化法，结合单因素考察优化微球的制 备工艺，并对微球的平均粒径、粒径分布、载药量、包封率 及体外释放等理化性质进行考察。结果：所得微球圆整度好, 表面光滑，平均粒径(4. 961 ±0. 56 ) 卩m , 径距 (1. 75±0. 18 ),包封率(54. 997±4. 05 ) %,载药量 (23. 16±1.70) %0结论：不锈钢膜乳化法可用于制备中药 难溶性成分水飞蓟宾PLGA微球，且所制备的微球粒径均一 可控，有较大的开发价值。 ［关键词］不锈钢膜乳化法；水飞蓟宾；PLGA微球 水飞蓟宾(s订ybin)是从菊科药用植物水飞蓟种子的 种皮中提取所得的一种二氢黄酮木质素类化合物。水飞蓟宾 是含2个非对映体水飞蓟宾A和水飞蓟宾B的混合物，2种 非对映体物质的量比约为1 : 1-水飞蓟宾对急性慢性肝炎、 代谢中毒性肝损伤和肝硬化具有较好的疗效［1］,近年研究 发现，水飞蓟宾在作为化疗保护和抗癌以及神经保护等方面 具有较大研究价值［2］。但是，水飞蓟宾由于难溶于水，口 服吸收生物利用度低，因此有必要开发其新剂型有利于提高 其生物利用度而增加其疗效［3］。本实验将不锈钢膜乳化法 应用于水飞蓟宾微球的制备当中，以期得到粒径较小且均一 的水飞蓟宾微球，提高水飞蓟宾的生物利用度，同时延缓水 飞蓟宾的释药速度，达到缓释的目的，减少给药次数，提高 用药安全性。本实验将聚乳酸-軽基乙酸共聚物（PLGA）作 为载体材料，对平均粒径、粒径分布、载药量、包封率等重 要指标进行检测，从而初步评价不锈钢膜乳化法在中药难溶 药物微球的应用［4］。 1材料 JEM-6700F冷场发射扫描电子显微镜（日本JEOL公 司），高速离心机（上海安亭科学仪器厂），LGJ-12冷冻干燥 机（北京松源华兴科技发展有限公司），马尔文激光粒径测 试仪（Mastersizer 2000,英国马尔文仪器有限公司），岛 津液相LC-20A （岛津企业管理中国有限公司），快速膜乳化 器（中国科学院过程工程研究所），不锈钢膜乳化装置（北 京中医药大学）。 水飞蓟宾（西安华萃生物技术有限责任公司），PLGA （LA-GA 75 ： 25,平均相对分子质量15 kDa,山东医疗器械 研究所），聚乙烯醇（PVA） 1788 （山西三维集团股份有限公 司），乙酸乙酯、甲醇、乙睛等（Fisher,色谱纯）。 2方法与结果 2. 1微球的制备 将水飞蓟宾溶于乙酸乙酯中，加入PLGA超声至溶解， 制成油相。PVA溶于水中，搅拌至溶解制成水相。将油相加 入水相搅拌1 min,倒入快速膜乳化器中，氮气加压，通过 不锈钢膜，制成0/W乳液。乳液中加入生理盐水磁力搅拌固 化1 h,离心清洗3次，每次5 min,最后将微球分散于生 理盐水中，抽真空冷冻干燥，得成品。 2. 2含量测定方法的建立 2. 2. 1标准曲线的建立Kromas订C18色谱柱（4.6 mmX200 mm, 5 um）；流动相甲醇T%冰醋酸（48 ： 52）；柱 温30 °C；流速0.8 mL ? min-1,进样量10 nLo精确称量 水飞蓟宾0. 010 8g,溶于100 mL量瓶中，用甲醇-乙睛（2 : 1） 溶液超声溶解，稀释定容至刻度，配制成质量浓度为108 mg?L-1的水飞蓟宾溶液。精密移取8, 6, 4, 2, 0. 1 mL水 飞蓟宾溶液置于10 mL量瓶中，定容至刻度，分别配置成质 量浓度为 86.4, 64.8, 43.2, 21.6, 1.08 mg ? L-1 的水飞 蓟宾溶液。以水飞蓟宾质量浓度（mg?L- 1）为横坐标，水 飞蓟宾峰面积（水飞蓟宾A与水飞蓟宾B峰面积之和）为纵 坐标进行回归。得到水飞蓟宾线性回归方程Y=30 848X-16 873, —0.999 2,在1?100 mg?L-1峰面积与质量浓度呈 良好线性关系。 2. 2.2精密度、稳定性及重复性考察 取上述64.8 mg?L-1的水飞蓟宾溶液，连续进样5次，每次10 PL,测 定计算得RSD 0. 37%,表明该方法精密度良好。 在0, 4, 8, 12, 24 h分别进样64. 8 mg?LT的水飞 蓟宾溶液10 nL,测定峰面积，结果RSD 1.2%,说明样品 溶液在24 h内稳定。 取同一批号水飞蓟宾5份配置成质量浓度为64.8 mg - L-1的水飞蓟宾溶液进样，测定峰面积，结果RSD 0. 59%, 说明重复性良好。 2. 2.3加样回收率试验精密称取空白微球5 mg,置于 10 mL量瓶中,分别加入高、中、低质量浓度(86.4, 43.2, 1.08 m