第五章体外分析技术教学课件.ppt

IRMA和RIA低剂量区的不确定因素示意图 RIA + + 或 0 1 IRMA + 1 第四节、电化学发光免疫分析. Ru + B + + Ru B Ru B 标记抗体 生物素 标记抗体 双抗体夹心复合物 试管中第一步反应 抗原 原理 SA + 试管中第二步反应 + + Ru B Ru B Ru B SA + Ru SA B 链霉亲合素的磁性微粒子 原理 电化学发光极宽的测量范围、高灵敏度 总结：体外分析的发展 体外分析中心 体外分析中心 标本保存间 放免室 放射性药品试剂盒 电化学发光分析 电化学发光分析 体外放射分析技术 体外放射分析技术优点 定量手段 生物学基础 体外分析技术 体外放射分析 体外非放射分析 放射性竞争结合分析 放射性非竞争结合分析 放射免疫分析 (RIA) 免疫放射分析 酶免疫分析 电化学发光免疫分析 荧光免疫分析 (IRMA) (EIA) (CLIA) (FIA) Dr. Yalow 放射免疫分析法（Radioimmunoassay) 在体外条件下, 利用Ag与定量的*Ag对限量的特异性Ab的竞争抑制结合反应，通过测定放射性复合物的量来计算出Ag 量的一种超微量分析技术 放射免疫分析法 Ag-Ab + Ag *Ag Ab Ag + + *Ag-Ab + *Ag (B) (F) Ag= * Ag , AgAb=*AgAb Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag(F) Ag *Ag , *AgAb (B) *Ag (F) ？ 基本原理 Ag *Ag Ab *AgAb AgAb *Ag + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B%=B/(B+F) F%=F/(B+F) R=B/F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 浓度 B% 标 准 曲 线 Ag 25 50 100 200 400 800 *Ag Ab 分离B、F B1% B2% B3% B4% B5% B6% 1 2 3 4 5 6 B% ？ 60 基本操作步骤 RIA的基本条件 第二节 免疫放射分析法 *Ab + Ag-*Ab + *Ab （immunoradiometric assay,IRMA） Ag （B） （F） 在体外, 利用Ag与过量的*Ab的非竞争性结合反应，通过测定放射性复合物的量来计算出Ag 量。标记抗体，抗体是过量的 RIA IRMA 竞争性抗原抗体结合反应 非竞争性抗原抗体结合反应 采用标记抗原 采用标记抗体 三种主要反应试剂 二种主要反应试剂 所用抗体是限量的 所用抗体是过量的 *AgAb的量与待测Ag的量呈负相关 Ag*Ab的量与待测Ag的量呈正相关 反应到达平衡慢 反应到达平衡快 低剂量区有不确定因素 低剂量区无不确定因素 IRMA与RIA工作原理的主要区别