课件：七三萜类化合物中药化学.pptVIP

7.显色反应 1）浓H2SO4-醋酐（Liebermann-burchard） 反应 样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋酐(1:20)，产生黄→红→ 紫→ 蓝等颜色变化，最后褪色。 甾体皂苷也有此反应，但颜色变化快，在颜色变化的最后呈现污绿色；而三萜皂苷颜色变化稍慢，且不出现污绿色。 2）三氯化锑或五氯化锑（kahlenberg）反应 将样品醇溶液点于滤纸上，喷以20%三氯化锑（或五氯化锑）氯仿溶液（不应含乙醇和水）干燥后，60-70 ℃加热，显黄色、灰蓝色、灰紫色斑点，在紫外灯下显蓝紫色荧光（甾体皂苷则显黄色荧光）。 注意：五氯化锑腐蚀性很强，宜少量配置，用后倒掉。 3）三氯醋酸（Rosen-Heimer）反应 样品溶液点于滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液，加热至100℃，显红色→紫色斑点。 4）氯仿-浓硫酸（salkawski）反应 将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯仿层呈现红色或兰色，硫酸层有绿色荧光出现。 5）冰醋酸-乙酰氯（Tschugaeff） 反应 样品溶于冰醋酸，加乙酰氯数滴及氯化锌 结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。 第六节 提取与分离 一、苷元的提取与分离 （一） 提取 1.醇提，提取物直接进行分离； 2.醇提，有机溶剂萃取； 3.制备成衍生物再进行分离； 4.将皂苷进行水解，有机溶剂提； （二）分离 硅胶吸附柱层析 二、三萜皂苷的提取与分离 特性： 难以结晶，多为无定形粉末。 由于糖分子的引入，极性基团明显增多，致使极性增强，故具有较大的极性而易溶于醇类溶剂、含水醇及水。 难溶于弱极性的有机溶剂。 ◆常用的提取方法 甲醇或乙醇 提取 石油醚等脱脂 正丁醇萃取 总皂苷 大孔 吸附树脂柱 （二）分离 1.分配柱层析法 以硅胶为支持剂，CHCl3-MeOH-H2O，CH2Cl2-MeOH-H2O，EtOAc-EtOH-H2O或水饱和的正丁醇等溶剂系统洗脱。 2.反相层析法 以反相键合相RP-18、RP-8或RP-2为填充剂，常用CH3OH-H2O或乙腈-水为洗脱剂。 第七节　结构测定 1、化学法 用Liebemman-Burchard反应和Molish反应鉴定三萜皂苷 通过苷键裂解，而到小分子的苷元和糖，使结构测定简单化。 苷元结构确定可采用氧化、还原、脱水、甲基或双键转位、乙酰化、甲酯化等化学反应将未知苷元结构转变为已知化合物，然后将其IR、mp、Rf或其它光谱数据与已知物数据对照的方法推测其结构。 二、三萜的波谱特征 1、紫外光谱(UV) 结构中有一个孤立双键:205-250nm 处有微弱 吸收; α、β不饱和羰基λmax:242-250nm； 异环共轭双烯λmax:240、250、260nm； 同环共轭双烯λmax:285nm。 多数三萜类化合物不产生紫外吸收，但以浓硫 酸为试剂测定五环三萜类化合物时，可在310nm处 观察到最大吸收，且不受母核上的取代基影响。 2、质谱 三萜类化合物质谱裂解有较强的规律： 1）当有环内双键时，一般都有较特征的RDA裂解； 2）如无环内双键时，常从C环断裂成两个碎片； 3）在有些情况下，可同时产生RDA裂解和C环断裂。 四环三萜类化合物裂解的共同规律是失去侧链。 皂苷难挥发，所以，EI-MS 和 CI-MS 技术在三萜皂苷的应用受以限制。但 FD-MS 、ESI－MS和 FAB-MS 在皂苷的结构检测中却得到了广泛应用，这些质谱的应用可以得到皂苷的准分子离子峰（quasi-molecular ion peaks）[M+H]+、[M+Na]+ 和[M+K]+等，或[M-H]-峰； 3.、1H-NMR 1） 环内双键质子的δ值一般大于5，如齐墩果酸类和乌苏酸类C12烯氢在δ4.93～5.50处出现分辨不好的多重峰。 环外烯键的δ值一般小于5，如羽扇豆烯的C29位两个同碳氢信号多出现在δ4.30～5.00。 2）乙酰基质子的δ值在1.82-2.07。 对于绝大多数齐墩果烷型和乌苏烷型三萜，当-COOCH3位于C28位时，其甲酯的δ值小于3.795，否则就大于3.795。这一规律常用于推定齐墩果烷和乌苏烷母核中C28位的羧基。 大多数三萜化合物C3上有羟基或其它含氧基团，此时，C3质子的信号多为dd峰。以3-乙酰氧基取代的三萜衍生物为例，C3-H为竖键(α-H,β-Oac)时，其δ值在4.00-4.75之间，最大偶合常数为12Hz左右；C3-H若为横键（β-H,α-OAc），δ值在5.00-5.48之间，最大偶合常数约为8Hz，二者均为宽峰。 δ3-H：4.00-4.75,J=12Hz δ3-H：5.0