反应型荧光法测定多巴胺和手谷胱甘肽的研究分析.docxVIP

青岛科技大学研究牛学位论文 \\II\II \II\I I II\I III I\I IIIII II Y2553130 反应型荧光法测定多巴服和谷脱甘肤的研究 摘要 随着生命科学的发展，人们对多巴肢 (DA)和谷肮甘Hà (GSH)两种生物 小分子在生命科学中的重要作用了解的越来越多，因此建立快速、准确和简便 的多巳服和谷肮甘肤的检测方法对生命科学和临床医学等领域都具有重要的意 义。荧光分析法因其灵敏度高、选择 f性哇好、简单快速 H )应监用于生物小分子的检测中。本文利用多巴肢和谷脱甘 Hà与荧光特异性试剂的 反应，结合荧光技术建立了两种多巳胶和三种谷肮甘 Hà测定新方法。 本论文主要分为以卡.五个部分: (1)利用Mn2+f崔化 DA 生成的四日类化合物与具有强荧光性质的 2，3-二氨 基吩嗦 (DAP)缩合，使 DAP 荧光狞灭，通过测定 DA 加入前后荧光强度变 化运量检测 DAo DA 浓度在 2.0 x 10-6 M 6.l x 10-5 M 范围内与荧光强度战 变量呈线性关系，检测限是1.76 x lO-6 M。 (2)利用乙二醒作为荧光衍生剂与 DA 反应生成强荧光物质测定 DAo DA 的浓度在1.0x 10-7 1.0x10-5 M 范围内与荧光强度呈线性关系，检出限为 3.35x l0-8 Mo +(3)利用茜袁红 CARS) 在 BR 中有强的荧光发射， CU2 可猝灭 ARS 在 + ++BR 缓冲榕液中的荧光，而 GSH 的琉基与 Cu2 的强络合作用可使体系荧光恢复， 根据荧光强度定量的检测 GSHo 在 pH6.3 的 BR 缓冲溶液中，菌素红 _Cu2 体系 荧光强度的增强值与 GSH 的浓度在1.0xl0-5 1.9xlO-4 M 范围内呈线性关系， 检测限为1.0xl0-5 Mn + + (4) Hg2+可以猝灭 1，8 -惠二磺酷甲脏的荧光，加入 GSH 后，由于 GSH 所带的琉基 (-SH)和 Hg2+里强的结合作用，夺取了与 1，8 一惠二一醋酷甲肢络合 的 Hg2+，体系的荧光强度增大，据此可快速的测定GSHo 1，8 一惠工横M:甲肢 体系荧光强度的增强值与 GSH 的浓度在 2.5x lO-6 3.5xto-5 M 范围内呈线性关 系，检测 是1.68xlO-6 Mo (5)合成的 5- (2-甲墓-4-二氟甲基-哇哇 -5-基)-[1，3，4]唾二l唾-2-基肢(MTA) 具有强荧光，并能与 Hg2+发生络合作用， GSH 中的琉基与 Hg2+里强的络合作 用能使 MTA 荧光恢复，据此检测 GSH。体系荧光强度的变化量与GSH 的浓 反应型荧光法测定多巴胺和谷胱甘肽的研究度在1．OxlO‘5～5．Oxl04M范围内呈线性关系，检测限为6．0xlO6M。 反应型荧光法测定多巴胺和谷胱甘肽的研究 度在1．OxlO‘5～5．Oxl04M范围内呈线性关系，检测限为6．0xlO6M。 关键词：多巴胺；谷胱甘肽；2，3．二氨基吩嗪：乙二醛；茜素红；l，8一蒽二磺 酰甲胺；5·(2·甲基4-三氟甲基-噻唑．5．基)．[1，3，4】噻二唑．2．基胺；荧光分析法 II 青岛科技大学研究生学位论文STUDIES 青岛科技大学研究生学位论文 STUDIES ON THE DETERMn哪ION OF DOPAMINE AND GLU丑玎HIONE BASED ON REACTI、厂E FLUORESCENCE METHOD ABSTRACT With the development of life science，the important role in life science of biological small molecules，such as dopamine(DA)and glutathione(GSH)，were widely recognized by people。Therefore，establishing rapid，accurate and convenient testing method of dopamine and glutathione on life sciences，clinical medicine，and other fields has important significance．Due to the hi班sensitivity,good selectivity,the advantages of simple and good stability,fluorescence analysis method has been widely applied in the detection of biologica