二甲双胍字预处理对抗小鼠急性缺血性脑损伤的作用研究-药理学专业毕业论文.docxVIP

浙江大学颐上学世论文 浙江大学颐上学世论文 致i!jj 致 谢 岁月如梭，转眼间两年半的硕士学习生涯即将结束，仿佛经历了一次人生的 蜕变，懂得了许多，也成长了许多。回首望去，那些忙碌、艰辛、感动、喜悦、 兴奋的时刻依然会那么清晰的浮现在眼前。 首先，特别感谢我的导师陈忠教授。从最初的阅读文献到设计实验，陈老师 带领我一步步走进科研之门。在一次次组会中，教导我如何分析实验结果、把握 课题的全局方向。最令我难忘的是在课题遇到瓶颈的时候，陈老师更是十分耐心 认真地引导、帮助我寻找突破口，鼓励支持我，让我重新找回自信，最终在陈老 师的带领下成功走出困境。在我心里，陈老师不仅是一位尊敬的长者，常常以您 自身的经历与丰富的阅历教导我们“做人做事做学问”的道理；您还是一位慈父，像 对待孩子一样关心我们的生活，宽容我们的缺点，让实验室成为我们第二个家。 衷心感谢张翔南老师对我一贯的耐心指导和帮助，教会我实验的点点滴滴。 感谢实验室张世红老师、胡薇薇老师、侯伟伟老师对我课题研究的支持与帮助。 感谢袁扬师兄教会我各项实验技能以及对我实验的帮助。感谢蒋磊师姐、沈哲师 兄、廖儒佳、祖筠筠、郑艳榕、吴晓丽、李彦昕等同学对我课题的帮助。感谢实 验室所有小伙伴们，正是因为你们的存在才让我们的大家庭更温暖，才让我的硕 士生活更丰富多彩。 最后，感谢我的父母、亲人、朋友，感谢你们一直以来对我的支持、关怀和 鼓励，你们永远是我最坚强的后盾。还有太多感谢的话语，虽然没有说，但我会 一直默默记在心底。谢谢大家! 万方数据 浙江人‘二颐士学位论文 浙江人‘二颐士学位论文 中文摘要 二甲双胍预处理对抗小鼠急性缺血性脑损伤 的作用研究 浙江大学药学院 药理学 硕士研究生 邓恬 导 师 陈忠教授 摘要 目的：长期服用二甲双胍可有效降低糖尿病患者的脑卒中发生率。然而，在脑缺 血急性损伤期，二甲双胍是否具有抗脑缺血损伤作用尚不清楚。本研究拟探讨二 甲双胍的抗急性缺血性脑损伤作用及其特征，并初步探索其作用机制。 方法：雄性C57BL 76小鼠进行永久性或短暂性大脑中动脉阻塞(permanent middle cerebral artery occlusion，pMCAO；transient MCAO，tMCAO)手术建立脑缺血动物模 型。二甲双胍3，10，30 mg／kg／d分别于MCAO手术前1，3，7 d；或缺血即刻或再灌 即刻；或再灌后1，3，6 h腹腔注射给药。MCAO缺血或再灌后12 h，取右侧大脑 皮层组织检测细胞凋亡相关蛋白、AMPK、pAMPK的表达。MCAO缺血或再灌后 24 h检测脑梗死体积与神经症状评分。 结果：二甲双胍10 mg／kg／d预处理7 d-9模型组相比能显著减少pMCAO所致脑梗 死体积及神经症状评分，并有效抑制缺血诱导的细胞凋亡，表现为Bcl．2／Bax比值 的升高以及cleaved Caspase．3表达的下降。但二甲双胍其它剂量，3 mg／kg／d和30 mg／kg／d，则没有神经保护作用。当二甲双胍10 mg／kg／d的预处理时间缩短至3 d， 其保护作用也相应的下降；而当预处理时间缩短至l d或者在缺血即刻给药时，二 甲双胍的保护作用消失。在短暂性脑缺血tMCAO模型中，预处理二甲双胍对缺血 再灌诱导的脑组织损伤没有保护作用。并且，当再灌3 h后给予二甲双胍则进一步 II 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 加重缺血性脑损伤。此外，在缺血的脑组织中，二甲双胍10 mg／kg／d预处理7 d 后，AMPK-9 pAMPK的表达显著下调，而缩短预处理时间或改变二甲双胍的给 药剂量或在tMCAO模型中，AMPK与pAMPK表达下降的程度均不显著。AMPK 抑制剂Compound C能够协同增强二甲双胍的抗缺血性脑损伤作用。 结论：本研究发现在脑缺血损伤急性期，二甲双胍预处理是其产生神经保护作用 所必需的，10 mg／kg／d预处理7 d可显著减轻缺血性脑损伤；但二甲双胍对伴随血 流复灌的脑缺血损伤无保护作用。二甲双胍预处理下调AMPK可能与其保护作用 相关。 关键词：脑缺