课件：中药指纹图谱研究技术中华中医药学会.pptVIP

第一次优化 流 速： 2.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 20 ℃/min 第二次优化 流 速： 1.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 10 ℃/min 第三次优化 流 速： 1.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 5 ℃/min 第四次优化 流 速： 0.5 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 5 ℃/min （2）选择细化的初始条件-由细到精 初始条件 流 速： 1.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 50 ℃ 升温 速 率： 1.0 ℃/min 第一次优化 流 速： 1.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 150 ℃ 升温 速 率： 1 ℃/min （3）根据初始条件（由粗到精）下的色谱图，计算 大多数色谱峰出峰时的柱温范围，确定第一次 优化时柱温的梯度变化范围。 初始条件 结果： RT=7min后，基本没有色谱峰；RT=8min后，基线平直。 主要色谱峰被洗脱时的RT：4min~7min 主要色谱峰被洗脱时的柱温范围：170~250 第一次优化 流 速： 1.0 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 100 ℃ 升温 速 率： 5 ℃/min 第二次优化 流 速： 0.5 ml/min 进样口温度： 250 ℃ 检测口温度： 280 ℃ 初 始 柱 温： 100 ℃ 升温 速 率： 5 ℃/min 结 论 对本供试品中的组分的分离，升温速率是主要影响因素，载气（N2）的流速是次要因素。 本供试品中的挥发性组分，其沸点相对较高，故应相应提高初始柱温的设置值。 载气（N2）的流速的调整可改善色谱峰的分离。 ?注意的问题 条件优化的目的： 应尽可能使每个色谱峰为单一色谱峰 保证大多数峰及/或含量较高的成分达到基线分离。 初始柱温的设置 梯度变化的速率 保留时间 最佳~30min 溶剂空白 1.注意的问题 溶剂色谱峰--色谱纯试剂 杂质（敷料）色谱峰--分离提取 相似度值的计算 3. 指纹特征 特征指纹峰与特征指纹区 （五）、相似度值的研究与指纹特征 指纹图谱研究过程中的复杂样品的选择 有效组分的复方制剂 西洋参与淫羊藿 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 Kromasil Diamonsil Carbosorb （5） 检测成分的选择 （重点） 示例：何首乌 何首乌生品的液相色谱图（全局图） 何首乌生品的液相色谱图（局部放大图） 图9 上海制首乌指纹图谱 北京良方药业制首乌 北京金象药店制首乌 北京寿春堂药店制首乌指纹图谱 （6） 流动相（梯度表）的选择 主要影响因素 1. 起始浓度 2. 梯度速率 3. 流速 时间∕min 水%（H+/OH-）* 乙腈%* Ⅰ ? 0 100 0 55 20 80 60 0 100 Ⅱ ? 0 100 0 40 70 30 60 60 40 Ⅲ ? 0 80 20 40 60 40 60 50 50 Ⅳ ? 0 60 40 40 30 70 60 0 100 * 为体积百分比（V/V） 指纹图谱流动相梯度优化 * 为体积百分比（V/V） 梯 度 表 初始色谱条件 时间（min） 水%（H+/OH-） 乙腈% 0 100 0 60 0 100 时间（min） 水%（H+/OH-） 乙腈% 0 100 0 55 20 80 60 0 100 初始色谱条件的设定依据及目的 依据：化合物极性大小。如未知时，假设有