肝移植免次疫耐受机制实验分析.docx

博士研究生毕业论文 博士研究生毕业论文 肝移植免疫耐受机制实验研究 中文摘要 肝移植免疫耐受机制实验研究 与亥又曲；荔：i炙‘且域． 论文一、大鼠原位肝移植模型的建立． 为研究肝脏移植免疫耐受机制，寻找合理的诱导耐受和控制排斥反应的治 一“———”——一P—___一4一 疗方案，本实验应用显微外科技术建立了大鼠原位肝移植动物模型，并对动脉 化和非动脉化双袖套法大鼠原位肝移植模型进行了比较。 (本实验选用近交系Lewis(LEw)大鼠，共进行同系原位肝移植105例。 t 其中非动脉化大鼠原位肝移植97次，第二阶段手术成功率达92％，较第一阶 段显著提高(p0．05)；动脉化大鼠原位肝移植8次，手术成功率75％，较非 动脉化模型(第二阶段)显著降低(p0．05)。第二阶段非动脉化模型供、受 体手术时间、肝上下腔静脉吻合、受体无肝期及移植物热缺血时间均较第一阶 段明显缩短(p0．05)，而动脉化模型供、受体手术时间明显较非动脉化模型 增加(p0．05)。血管吻合口漏血造成的失血性休克为手术失败的主要原因， 此外供肝质量和袖套技术也是决定手术成败的重要因素。第二阶段术后一周生 存率为94．7％，明显高于第一阶段(p0．005)，而动脉化组与非动脉化组一周 生存率无明显差别(p0．05)。胆道并发症是手术成功受鼠的主要死因，动脉 化组胆道并发症较少。移植肝脏有一过性的炎性改变，非动脉化组较动脉化组 胆管上皮变性增加。大鼠原位肝移植术后血清总胆红素(TBIL)和血清谷丙转 氨酶(ALT)一过性升高，动脉化和非动脉化组受体大鼠术后无显著性差异。 博士研究生毕业论文 博士研究生毕业论文 中文摘要 实验者认为：(I)改良二袖套法大鼠原位肝移植模型是肝移植基础研究的理 想工具；(2)本实验动物模型获得了较高的成功率和术后一周生存率，提高手术 技术和熟练程度是保证手术成功的关键：(3)重建肝脏动脉血供对于保持肝脏正 常组织形态，防止胆道并发症有重要作用，但同时增加了手术时间，减低了手 术成功率。(4)非动脉化模型也是安全可靠的，且相对简便、省时，是肝移植排 1 斥的基础研究的合适工具。f一)一一 论文二、大鼠肝移植免疫耐受机制的实验研究， 第一部分：大鼠原位肝移植免疫耐受； ， {在建立大鼠模型的基础上，本实验选用近交系BrownNorway(BN)、LEW 和SD大鼠，进行大鼠原位肝移植和皮肤移植手术，观察肝移植耐受现象，并 对其机制进行了探讨。 进行三组实验：1．同种异系(BN—LEw)原位肝移植组(n_36)，研究大 鼠原位肝移植术后免疫耐受及其机制；2．同种同系(LEW—LEW)原位肝移植 (n=36)作为对照，以去除排斥反应以外的因素；3．皮肤移植，包括同种异系 (BN—LEw)皮肤移植(n=6)，同种(BN—LEW)肝移植后相同供者(BN) 的皮肤移植(n-6)和无关供者(SD)皮肤移植(n-6)，以证明大鼠原位肝移 植耐受的供者特异性。 结果发现：LEW—LEW及BN—LEW大鼠肝移植受体术后一般情况，平 均生存时间无显著性差异(p0．05)。BN—LEw肝移植手术可明显延长同一供 者皮肤移植物存活时间(p0．05)，而对无关供者则无保护作用。LEW—LEW 肝移植术后无明显排斥反应，随时间组织学表现无限显著改变。BN—LEw肝 2 博士研究生毕业论文 博士研究生毕业论文 中文摘要 移植术后早期(2周内)出现明显的急性排斥反应表现，急性排斥反应评分升 高，术后第7天达到高峰，但随后逐渐缓解，至术后28天基本恢复正常。LEW —LEw及BN—LEW肝移植术后TBIL和ALl’均出现一过性升高，两组间无 显著性差异(pO．05)。BN—LEW组移植肝脏浸润淋巴细胞(GIC)计数，实质 细胞凋亡指数(AI)均于术后逐渐升高，术后7天达到高峰，随后下降，术后 28天恢复正常，间质细胞AI于术后7天达到高峰后下降较慢，术后28天仍明 显高于LEW—LEW组。LEw—LEw组GIC计数、实质和间质细胞AI均持续 保持较低水平。BN—LEW组受体术后l天至28天均可检测到供者来源的细胞 (ox．27阳性)存在，移植肝脏间质和受体脾中均有供者细胞存在。 试验者认为：(1)BN—LEW原位肝移植可产生良好的耐受性，是研究肝移 植免疫耐受的合适品系组合；(2)BN—LEW原位肝移植术后产生全身性、供者 特异性的免疫耐受；(3)肝移植耐受是主动诱导的过程；(4)肝移植耐受机制可 能与浸润淋巴细胞凋