甘蓝型油菜新类型力的创建和油菜亚基因组间杂种优势分析.docx

甘蓝型油菜掰类型创建及油菜亚基因组闻杂种优势研究甘蓝型油菜新类塑创建及油菜亚基因组间杂种优势研究 甘蓝型油菜掰类型创建及油菜亚基因组闻杂种优势研究 甘蓝型油菜新类塑创建及油菜亚基因组间杂种优势研究 摘要 本疆究论文主要涉及三令方瑟豹磅究沟容：一，裂溪AFLP帮SSR分子标记分 析不同油菜品种(系)的潺传多样性；二，五倍体杂种(ArA“B。C“C‘)产生以及细 胞遗传学分析；三，甘蓝型油菜新类型(ArA‘C。C。)在油菜亚基因组问杂种优势利 髑疆究。主要磺究结果如下： 1对64对AFLP引物进行了筛选，其中27对引物在油菜中能够扩增出比较清 晰带纹。本实验选用的19对引物在21个油菜品种中麸扩增出1578条带，平均每对 g|物扩增出83．05条带。对SSR反应条l串透毒亍了摸索，嗣时对40对SSR引物避行 了多态性筛选，利用其中19对扩增效采较好的引物对21个油菜晶荦申进行了遗传多 样性分析。缩粜表明：19对SSR引物在21个油菜品种中共扩增出212条带，熊中 194条是多态性的带。 2对l对、2对、3对纛至19对AFLP和SSR萼}物所德到遗传聚类图和全部标 记(来自19澍AFLP引物和19对SSR引物的产物)所得到的遗传聚类图进行了比 较分析。结果发现，3对AFLP引物得蒯昀遗传聚类图和全部产物粱类图相似性系 羧就这蜀0．9214，该聚类甏跫经可敬终尼释不弱类羹溜菜区分开寒。随着；l穆鼗蹩 的增加，和全部数据所得到的遗传聚类圈之间相似性系数逐步增加，但增幅比较缓 慢。相对AFLP标记来讲，利用较少SSR引物不能得剐可靠的聚类图。Mantel测验 摄示圭1578 AFLP标记积212 SSR标记联缮到熬遗傣浆薄穗全邦黪数攥辑褥到的遗 传聚类图(1578 AFLP积212 SSR标记)具有很离的相关性，相似性系数分别为 0．9991 l和0，981 10。比较分析同样表明AFLP和SSR遗传聚阵具有很高的相似性， =者的提似性系数达到0．99388，这说明SSR分子标记谯遗传多样性分析中和AFLP 黼祥有效，餐蹩辑爱鲶gl麓对数要澈AFLP多。 3对埃寨俄比亚芥(B。B。C。C。)和白菜型油菜(A。A。)进行了杂交，得到了种 间杂种(A‘B。C。)。用两种方法对AfB。C。进行了加倍处理。结果表明：直接用秋水 秘素浸泡杂释缓撩静魏嵇效率相对较毫。霹进嚣了鸯鬟倍豢作静杂种季妻撩送露染鳃棒 观察。结果表明：完全加倍成功的杂种植株染色体数目为54条(A。A‘B。B。C6C。)。 原位杂交结果馒示，加倍杂种植株体细臌染色体中含肖16条B‘基因组染色体，随 翡该穆类型壤疆真歪是扶聚耱A‘塞℃。(拶27)经染色髂麴接爱缛到瓣。埃塞缓魄戴 芥和自菜型油粱杂种加倍檬株形态多介予双亲之问，与未加倍杂种植株相比，杂种 加倍植株营养生长繁茂，械株更加高大，株高超过双亲。 4对六穆豁獯拣(AWB。B。C。C。)程嚣蓝型涵菜熟嵇(A“AnC“C“)帮进雩亍了杂 华中农业大学搏士论文栗茂腾交，得到了五依体杂释(Ⅳ对B。C“C。)。实验结果表弼，六倍体植株和甘蓝型潞浆 华中农业大学搏士论文栗茂腾 交，得到了五依体杂释(Ⅳ对B。C“C。)。实验结果表弼，六倍体植株和甘蓝型潞浆 正反交结实性相差很大，以六倍体植株作母本时，在每个角果中可以得到大约2率立 种子，两以甘麓型酒菜徽母本时，则很飕褥劐融子，蕊六倍体植栋鞠甘蓝型油蘩杂 交结角率在正反交中差黧不太。染霞{零检查璧栗滚黉，缝大多数杂穗穰繇 (ArA“B‘CoC。)的染色体数圈是46条，占全部观察植株63．66％。GISH结果显示， 以B基因组DNA作为探针鞠染色体为46的体细胞进行杂交，其中8祭染色体上具 鸯缀强杂交信号。 5对五倍体杂种(ArAoB。C“C。)的丽个组合进行了细胞学分析，在80％的花粉 母细胞中出现19个二价体或者超过19个二价体，这说明减数分裂过程中来源不同 豹A7A8(寒蠢予毫菜型淫蘩戆Af基因援黢裳垂予莒蘸黧、溘菜戆A8藜因缓)帮C“／C。 (来自埃塞俄眈驻芥的c。蕊因组和甘蔬黧油菜的C“熬因组)基因缀染色体能够较 好的配对。原能杂交结果表明，减数分裂中期出现的额外染色体和后期的落后染色 体为Bc基嚣缀染色体。在聂傣体杂种自交嵇子中，发现了染色体数毯为38的静予， 露诧可醴拦灞，五倍体象静减数分裂过稷中，可{互l产生染色俸鼗霜为19静配子。 6分子标记分析结果表明，同一组合币同单株(染色体为38条)在遗传背景上 程在很大的差疑。ISG(Ar)炎化范围很大，从3．05％到44．13％，平均比例为24．04％。 帮ISG(A7)一群，ISG(e。掰占跪倒在不灞荦秣孛交纯瓷穰大，藏8。23％委43，25％， 平均比例为27．48％。在新甘妪型油菜中，ISG(At+cc)在11．61％和83．