甘蓝型油菜开花调控基知因bnflc.a10和bnfts的功能分析.docxVIP

研究生优秀毕业论文 甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC．AIO和BnFTs的功能分析目录 甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC．AIO和BnFTs的功能分析 目录 摘要 i Abstract ．．iii 缩略词表 vi 第一章前言 l 1．1文献综述 1 1．1．1植物开花调控机理概述 ．．1 1．1．2 FLC功能研究 ．．3 1．1．2．1 FLC的克隆 3 1．1．2．2 FLC的表达调控 3 1．1．2．3芸薹属植物FLC功能分析 ．．5 1．1．3刀功能研究 ．6 1．1．3．1拟南芥刀的克隆和表达调控 ．6 1．1．3．2刀促进开花的分子机理和成花素本质 7 1．1．3-3刀的进化与功能分化 9 1．1．3．4刀功能的新发现 ．11 1．1．4 MITE转座子 一12 1．1．4．1 MITEs的发现和序列特征 12 1．1．4．2 MITEs的分布 ．．14 1．1．4．3 MITEs的生物学功能 ．．14 1．2研究基础，目的和意义 ．1 5 1．2．1研究基础 1 5 1．2．2研究目的和意义 16 1．2．3研究内容 16 第二章BnFLC．A10等位基因功能分析 ．17 2．1实验材料 ．．1 7 2．1．1植物材料 l 7 2．1．2菌株和质粒 17 2．2实验方法 ．17 万方数据 华中农业大学2015届博士研究生学位论文2．2．1 华中农业大学2015届博士研究生学位论文 2．2．1 BnFLC AIO启动子和CDS序列分离 ．1 7 2．2．2载体构建 1 8 2．2．3甘蓝型油菜Westar的遗传转化和拷贝数鉴定 。18 2．2．4转基因植株分子鉴定 18 2．2．5花期表型考察 1 8 2．2．6转基因植株BnFLC．AIO定量表达分析 。19 2．2．7转基因植株Monkey King序列DNA甲基化检测 ．19 2．2．8拟南芥的转化 19 2．2．9单拷贝转基因拟南芥的筛选 19 2．2．10转基因拟南芥GUS活性分析 20 2．3结果与分析 ．20 2．3．1 Tapidor BnFLC．AIO启动子和CDS序列的分离和载体构建 ．20 2．3．2甘蓝型油菜转基因植株获得和拷贝数鉴定。 21 2．3．3甘蓝型油菜转基因植株花期表型 22 2．3．4 BnFLC．AIO在转基因植株中的表达 24 2．2．5转基因植株BnFLC．AIO启动子中Monkey King序列DNA甲基化分析 ．．：!：； 2．3．6转基因拟南芥中Monkey King对35S启动子活性影响 26 2．4讨论 ．27 2．4．1 BnFLC．AIO对甘蓝型油菜花期的调控 27 2．4．2 Monkey King对基因表达的影响 ．．28 第三章Monkey King在十字花科基因组中进化 30 3．1实验材料 ．30 3．2实验方法 一30 3．2．1 MonkeyKing在十字花科植物基因组中的提取和序列特征 ．．30 3．2．2 Monkey King进化树分析 ．．30 3．2．3 Monkey King在基因组中的插入位点分析 ．．30 3．2．4芸薹属植物基因组中Monkey King扩增多态性分析 3 1 3．2．5 Monkey King相关miRNA发现 3 1 万方数据 甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC．A10和BnFTs的功能分析3．3结果与分析 甘蓝型油菜开花调控基因BnFLC．A10和BnFTs的功能分析 3．3结果与分析 ．3 1 3．3．1 Monkey King在十字花科基因组中的分布 ．．3 1 3．3．2 Monkey King的进化树分析 。34 3．3．3 Monkey King插入位点的优先性和转录活性分析 一35 3．3．4芸薹属物种中Monkey King相关的种间和种内多态性分析 38 3-3．5 Monkey King相关miRNA的发现 。39 3．4讨论 41 3．4．1 Monkey King TIR序列的保守型 41 3．4．2 Monkey King对十字花科基因组和基因进化的影响 一41 第四章BnFTs功能分析 一43 4．1实验材料 ．．43 4．I．I植物材料 43 4．1．2质粒和菌株 43 4．2实验方法 ．43 4．2．1 BnFTs表达分析 一43 4．2．2不同B门刀拷贝编码序列ORF分离 。43 4．2．3载体构建与植物遗传转化 44 4．2．4不同BnFT转基因拟南芥花期表型考察 ．44 4．2．5甘蓝型油菜转基因拷贝数估算 44 4．2．6 p35S：：BnFTc转基因油菜花期表型考察 ．．45 4．2．6 p35S：：BnFTc转基因甘蓝型油菜植株株型考察 ．．45 4．2．7p35S：：BnFTc转基因甘蓝型油菜气孔开度与抗旱性分