课件：五愈伤组织培养.ppt

原因：2,4-D等生长素可以诱导内源乙烯（Eth）产生；内源Eth不影响愈伤增殖，但抑制愈伤组织进一步分化成胚。 乙烯也会导致纤维素酶或（和）果胶酶活性的增强，从而破坏胚性细胞团，使原胚不能发生组织分化。 2）其他植物生长物质的作用 细胞分裂素有利于胚状体的形成 0.1μg·L-1 玉米素促进胡萝卜体细胞胚发生。 GA3、ABA抑制成胚； 3）氨源形态的影响 还原N（NH4+） 氧化N（NO3-） 有机氮 （氨基酸、水解酪蛋白等） 野生胡萝卜叶柄节段的培养中，只有在含一定数量还原态氮的培养基时，才能有胚胎发生， 用NH4+ 和水解酪蛋白优于NO3- 或谷氨酰胺。 4）其他培养条件对胚状体发生的影响 液体培养 适宜pH5-6 光照：不需要光或半天光照时间 温度25 ℃左右 光照强度50-60 μE m2 s-1 光照强度5-10 μE m2 s-1 (图 光对大豆不同品种子叶体细胞胚发生的影响 ) 3.4 体细胞胚途径再生植物的优点 1）数量比不定芽多 2）获得速度快 3）结构完整 4）胚状体可制成人工种子，便于运输和保存； 5）胚状体的有性后代遗传性更接近母体植株。 第五章 愈伤组织的培养 第一节 愈伤组织的诱导和分化 第二节 愈伤组织中的形态发生 第三节 人工种子 人工种子是指外面包裹一层有机薄膜的植物胚状体。 胚状体或芽：有生命的物质结构。 人工胚乳：供胚状体维持生命力。 人工种皮：保护作用。 1 定义与结构 第三节 人工种子 1）结构完整，体积小，便于贮藏与运输，可直接播种，易于机械化操作； 2）不受季节限制，不受环境制约，胚状体数量多、繁殖快、有利于工厂化生产； 人工种子的优点: 3) 有利于繁殖生育周期长、自交不亲合、珍贵稀有的一些植物，也可大量繁殖无病毒材料； 4) 加入抗生素、农药、菌肥等成分，提高人工种子活力和品质； 5) 由无性繁殖体系产生胚， 固定杂种优势。 2 制作 人工种子制作过程 胚状体 人工胚乳 其他物质 人工种皮 包埋技术 第一步胚状体诱导 1）选取目标植物 2）诱导愈伤组织 3）愈伤组织增生 4）胚状体诱导 胚状体同步增殖： DNA合成抑制剂 低温处理 调节渗透压 分离过筛 调节植物激素配比 第二步人工胚乳制作 人工胚乳的成分 无机盐混合物 碳水化合物：淀粉和糖 蛋白质 各种附加成分：如固氮细菌、杀虫剂、杀菌剂、除草剂和植物激素等 第三步 人工种皮制作 1）包埋介质的选择： 无毒、透气、保水性好 有足够硬度（不胀大），保证安全（不泄露营养物） 包埋材料： 琼脂、琼脂糖、藻酸盐、明胶、淀粉、动物胶、角叉胶、刺槐豆胶、阿拉伯树胶、果胶、蛋白胶、黄芪胶等种类。 2）包埋技术 用褐藻酸钠等水溶性凝胶经与Ca2+进行离子交换后凝固，用于包埋单个胚状体。 贮藏与发芽 一般将人工种子贮藏在4-7℃低温、相对湿度小于67%的条件下。实际上，随贮藏时间的延长，人工种子的萌发率会显著下降。 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 黄连 人工种子取得了很大的进展，但至今仍有一些问题没有解决： ◆人工种皮尚不尽如人意，贮藏困难 ◆生产成本高 ◆流程复杂 4 局限性： 第五章 愈伤组织的培养 第一节 愈伤组织的诱导和分化 第二节 愈伤组织中的形态发生 第三节 人工种子 1.名词解释：愈伤组织 胚状体 2.愈伤组织培养对外植体有何要求？ 3.愈伤组织形态发生有哪些情况？ 思考题 器官培养（Organ culture ） ： 主要指植物根、叶、茎、花、果实等器官在离体条件下，在无菌的人工环境种做进一步培养发育，最终长成幼苗的过程。 特点：能保持它们所具有的特征性结构，通过器官培养可快速大量地繁殖。 第六章 营养器官培养 第六章 营养器官培养 第一节 根的培养 第二节 茎的培养 第三节 叶的培养 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * * 易碎的愈伤 坚硬的愈伤 生根的愈伤 渗出粘性多糖的愈伤 根据愈伤质地划分为： 文心兰的根（a）茎（b）叶（c）诱导的愈伤组织 根据愈伤发生部位： 胚性愈伤组织 表面呈颗粒状、组织结构紧凑、再生力强。 非胚性愈伤组织 表面粗糙、组织结构疏松。　 根据愈伤难易程度： 胚性愈伤组织容易形成胚状体 非胚性愈伤组织诱导率可达100％，胚性愈伤组织诱导率相对较低。 愈伤组织生长周期 愈伤组织生长周期为2－4周。 在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，或有毒代谢