小鼠抵抗CD4T细胞NKT细胞T细胞耗竭SCIDRAG.PPT

自身免疫性肝炎实验模型中的T细胞、NKT细胞、NK细胞 导言 ConA注射小鼠或大鼠诱导急性或慢性肝损 依赖T细胞和肝巨噬细胞的激活 研究集中于免疫介质和细胞，该模型中肝细胞损伤的相关机制 该模型用于研究： 免疫介导的肝炎 过度激活免疫应答的治疗 小鼠ConA诱导的肝损伤免疫细胞 小鼠ConA诱导的肝损伤免疫介质 小鼠ConA诱导的肝损伤保护性因子 自身免疫性肝炎（AIH） 一种主要在门静脉周围的病因不明的慢性人类肝炎，是一种特发性疾病，可以导致肝硬化 特征性自身抗体 抗核抗体（ANA） 抗平滑肌抗体（SMA） 肝肾微粒体（LKM）抗体 针对细胞色素P450 (CYP) 2D6和UDP-glucuronosyl-转移酶，识别可溶性肝抗原（SLA）或肝胰抗原（LP）的抗体 循环中抗人唾液酸糖蛋白受体 hASGPR抗体 易感个体外在始动因素： 病毒感染 药物反应：替尼酸，双肼屈嗪，氟烷 其它肝毒素 伴发其它自身免疫病 原发性胆汁性肝硬化（PBC） 原发性硬化性胆管炎（PSC） 特征见附表 实验性自身免疫性肝炎（EAH） 1990年，Lohse等，用合成的可溶性肝抗原免疫诱导的肝炎 C57BL/6小鼠最易感 在泼尼松龙转基因鼠中建立CD4+T细胞依赖性自身免疫性肝炎 Th1细胞因子应答 血清抗核抗体水平显著升高 特征见附表 Con A诱导的小鼠肝炎 Con A：刀豆素A——黑豆中的植物凝集素，T细胞丝裂原 单一鼠静脉注射8到24小时内导致严重肝炎 8小时内，转氨酶释放，肝内DNA片段增多 24小时后，转氨酶水平下降，肝再生明显 Con A诱导的肝炎是在体研究T细胞激活-诱导的肝损伤的基本规律的模型 依据见附表 AIH/EAH和ConA肝炎的区别与联系 T细胞在Con A诱导的肝炎中的作用 CD4+T细胞浸润：Con A给药后6到8小时内CD4+T细胞开始浸润肝实质，8小时后聚集达到6倍。24小时后大多数CD4+T细胞以大细胞群形式分布于门静脉周围，肝窦内几乎检测不到CD4+T细胞 黏附因子：Con A诱导的CD4+T细胞聚集依赖于E－选择素，ICAM-1和VCAM-1，阻断黏附因子显著抑制肝内浸润，但不能防止肝损 CD4+和CD25+ T细胞开始浸润之前，TNFα和IFNγ依赖的细胞内途径——干扰素调节因子（IRF）-1表达、c-JunN末端激酶（JNK）激活——导致肝损，中和因子不能阻断细胞聚集；其它肝内细胞：NKT，其它T，Kupffer细胞 缓解阶段， CD4+T细胞参与清除有害淋巴细胞浸润，CD44依赖 NK细胞在Con A诱导肝炎中的作用 不起主要作用 不直接参与肝损： RAG-/-小鼠对Con A抵抗 perforin-/-小鼠比wt鼠更敏感 NKT细胞 NKT细胞表型： CD4+：60％，DN：40％； 活化T细胞表面标志：Thy1high, CD44high, CD45RBhigh 表达NK细胞表面标志：NK1.1int, IL-2Rβint, CD69int(15%), Ly49C(60%) 表达恒定TCRα链：Vα14-Jα281和Vβ8(55%, 主要Vβ8.2)、Vβ7（14％）或Vβ2（7％）？其中之一 识别单一形态的NHCI类样分子CD1d提呈的糖脂 来源：胸腺和胸腺外，分布于不同组织 胸腺、肝脏——CD1d依赖的CD4+多见 脾、骨髓——CD1d非依赖的DN和CD8+多见 在感染、抗肿瘤和自身免疫中NKT细胞的作用 NKT 是清除细菌、寄生虫及肝内抗病毒活性需要的 NKT激活抗肿瘤，抑制自身免疫 NKT针对“修饰的自我”有自身免疫性，但无害 离体和在体激活迅速产生大量细胞因子：IL-4, IFNγ IFNγ应答对于清除病原重要 与IFNγ依赖的效应相反，IL-4介导抑制Th1相关的自身免疫 αGalCer诱导的NKT细胞介导的抗病毒和抗肿瘤效应 对HBV感染的抵抗力由人造的特异性NKT细胞抗原αGalCer诱导 由αGalCer或IL-12诱导的抗病毒和抗肿瘤效应似乎由产IFNγ的NKT细胞介导，后者依次激活肝和脾的NK细胞的细胞毒性 对于自身免疫： 第一次注射：诱导高水平IL-4, IFNγ；肝脾内NKT迅速活化诱导细胞死亡 一周内：离体再刺激后，肝细胞再生，产生大量Th2细胞因子 重复给药，向Th2细胞应答极化 Th1相关自身免疫治疗的希望 问题：首次剂量造成严重肝损！ NKT细胞在ConA诱导肝炎中的作用 正方：NKT细胞是ConA诱导肝炎中的重要的亚群 在体刺激后立即活化产生大量IFNγ和IL-4 活化NKT细胞24h内引发肝毒性 肝内NKT细胞主要是CD4+，因此属于介导ConA肝炎的T淋巴细胞亚群 反方：反驳NKT引发作肝损伤观点的推理 ConA诱导肝炎与自身免疫性肝炎有相似处 NKT