2019版高考生物二轮复习 专题六 生物工程与技术 第十五讲 基因工程与细胞工程.pptVIP

-*- 考点1 考点2 (1)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,其产物长度为　　　　　　　　　　　　　　　　　。? (2)若图1中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有　　　　　　种不同DNA片段。为了提高实验的成功率,需要通过　　　　　　　　　　技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。? (3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是　　　　　　　　　　。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加　　　　　　　　　的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含　　　　　　　　　　的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。? -*- 考点1 考点2 (4)假设用BamHⅠ切割DNA获取目的基因,用MboⅠ切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHⅠ?　　　　　　　　　　。为什么?　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? 答案: (1)537bp、790bp、661bp (2)2　PCR (3)BamHⅠ　抗生素B　抗生素A (4)不一定能　因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处不一定出现GGATCC序列 -*- 考点1 考点2 解析: (1)根据题意,限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG,完全切割图1中的DNA片段,会产生平末端,在图1中有两个限制酶SmaⅠ的酶切位点,DNA将被切割成3个片段,其产物长度为534+3=537(bp)、796-3-3=790(bp)、658+3=661(bp)。 (2)若图1中虚线方框内的碱基对被T—A碱基对替换,基因D就突变为基因d,那么基因d上只有一个限制酶SmaⅠ切割位点,被限制酶SmaⅠ切割的产物长度为534+796-3=1 327(kb)、658+3=661(bp),因此从隐性纯合子(dd)分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有2种不同的DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过PCR技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。 -*- 考点1 考点2 (3)由图1可知,目的基因两侧是GGATCC序列,该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列,因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒,应选用限制酶BamHⅠ切割。用限制酶BamHⅠ切割质粒后,破坏了抗生素A抗性基因,但没有破坏抗生素B抗性基因,因此首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌,能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌;再用影印法接种到含有抗生素A的培养基上培养,能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌。最后将能在含抗生素B的培养基上生存,但不能在含抗生素A的培养基上生存的大肠杆菌菌落进行培养,即可得到含重组质粒的大肠杆菌。 (4)若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,不一定能用BamHⅠ,因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处不一定出现GGATCC序列。 -*- 考点1 考点2 策略方法限制酶及其切点的分析 (1)一个至多个限制酶切点:作为载体必须具有一个至多个限制酶切点,以便与外源基因连接。 (2)每种酶一个切点:每种酶的切点最好只有一个。因为每种限制酶只能识别单一切点,若载体上有一个以上的该酶切点,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制原点区,则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点,则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片段,又不会丢失自己的片段。 -*- 考点1 考点2 题点2　考查基因工程在生产、科技中的应用? 2.多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG量合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如图。据图回答下列问题。 -*- 考点1 考点2 -*- 考点1 考点2 (1)若已获取PG的mRNA,可通过　　　　　　获取PG基因;在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录,结构A上应具有　　　　　　　　　　　　结合位点;重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? (2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有　　　　　　　　　　的培养基进行筛选。由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达。? (3)若　　　　　　　　　　　　　,则可确定转基因番茄培育成功。获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因,科研人员常用