对大豆异黄酮与疾病关系的探析.docVIP

PAGE PAGE 1 对大豆异黄酮与疾病关系的探析 　　【摘要】本文介绍近年来对大豆异黄酮的研究概况，包括大豆异黄酮的提取分离、含量测定、生理活性及其在体内的吸收代谢进行了讨论和展望。 　　【关键词】大豆异黄酮；雌激素；提取分离；含量测定；生物活性自由基；生理机能 　　大豆异黄酮（SoybeanIsoflavone，SIF）是大豆成分中的一种非营养素，它能和雌激素受体（ER）相结合，发挥其生物活性，具有和雌激素类似的生物作用，因此，被称为植物雌激素（phytoestrogen）。近年来，对大豆生物化学的研究发现，SIF具有抗癌、抗氧化、消除自由基、预防骨质疏松、预防心血管疾病、改善妇女更年期综合征等生物作用。 　　1SIF的成分及提取分离 　　1.1大豆异黄酮的成分及原料处理对其影响大豆异黄酮是在大豆生长过程中二次代谢所形成的物质，在大豆总成分含量中仅占到0.04%-0.5%。目前，研究发现大豆异黄酮包含有12种化合物，其中主要包含三种游离型苷元，分别是大豆黄素（glycitein）、大豆苷元（daidzein）、染料木素（genistein），这三种苷元主要是以相对应的β-葡萄糖苷的形式存在，而在大豆籽粒异黄酮中的游离型苷元含量较低；大豆异黄酮所包含的葡萄糖苷中，部分葡萄糖C-6羟基被丙二酰基所代替，另有一部分葡萄糖C-6羟基被乙酰基所代替[1]。大豆异黄酮中的糖苷被丙二酰化后，具有较强的水溶性，但不耐热，其溶液在热作用下易发生变性，分解变成糖苷，在干热的作用下脱羧基转变成乙酰糖苷[2]。发酵、发芽或β-葡萄糖酶解能让糖苷转化为苷元，因此，在发酵豆制品（丹贝、淡豆豉）中游离型大豆异黄酮的含量要比大豆籽粒中的含量明显增高。总之，对大豆进行加热或发酵，不会消除异黄酮，而仅能改变异黄酮的存在形式。另外，对大豆进行水洗处理可使异黄酮的含量大幅度地降低。 　　1.2SIF的提取分离目前，提取分离大豆异黄酮所用的原料主要是豆饼、豆粕、脱脂大豆片及豆渣，用含水乙醇或丙酮对原料进行浸泡，对溶液进行浓缩，分离加工可以初步得到比较粗糙的异黄酮，再用葡聚糖凝胶柱或聚酰胺柱进行深处理加工能得到较纯的异黄酮，如果利用超滤膜分离技术能得到更高纯度的异黄酮[3]。专门研究提取SIF的专家称，利用二步水解法能提取大豆异黄酮苷元产品，第一步，使用0.3%的乙酸溶液在80的℃水中对原料进行分解，时间要持续15小时，能使丙二酰糖苷转化为糖苷元；第二步，使用5%浓度的硫酸在80℃的水中对原料进行分解，时间持续20小时，可以使糖苷转化为苷元，再进行浓缩、抽滤、洗涤、烘干等程序得到大豆苷元粗品，再通过溶剂结晶处理能增加大豆苷元的纯度[4]。 　　对豆类原料用工业技术或手段来提取大豆异黄酮的研究较少，也鲜有报道，且工业提取的方法多属于未公开状态，其大体的提取工序可以总结为如下几步：浸提、浓缩、沉淀、调pH值、吸附分离、树脂分离、滤液喷雾干燥，得出成品。 　　2SIF的分布 　　SIF是以2-苯基色酮为主的化合物群，是一种混合物。1931年Walz从豆奶中利用甲醇第一次分离提取出SIF[1]；SIF也是一种植物化学素，主要存在于豆科蝶形花亚科植物中，属于植物黄酮，它在不同的植物中的含量也不相同，在大豆中的含量较高，一般能占到其成分总量的0.1%-0.5%[5]。不同地区种植的大豆，或大豆种植的条件不同，在其中的含量也不相同，异黄酮含量还受到大豆贮存时间、大豆的品种、颗粒大小及大豆不同部位的影响而含量不同。大豆的种皮、胚轴及子叶中都含有SIF，子叶、胚轴中含量较高，其中子叶中异黄酮的含量占到80%-90%，浓度为0.1%-0.3%。胚轴中异黄酮种类较多，含量也较高，占SIF总含量的30%-50%，浓度为1%-2%，浓度为子叶中异黄酮浓度的30-60倍[6]，而在种皮中含量不高[1]。大豆中染料木素约占异黄酮的50%-60%，大豆甙元约占30%-35%，黄豆黄素约占5%-15%。且在不同的原料中含量也不相同[7]。大豆中异黄酮主要是以二酰基配糖体的形式存在，乙酰配糖体及配基的存在形式较少。 　　3SIF的含量测定 　　3.1紫外分光光度法（UV）这种检测方法易于操作，是检测制剂中总异黄酮或粗提物的有效的方法。它的原理是根据异黄酮类化合物中的羟基及芳环所形成的共轭体系对50-260nm紫外光线具有强烈的吸收性，因此，可以通过测定其中的一种成分对照测量总异黄酮的水平[8]。张玉梅等[8]以Genistein为对照，利于259nm紫外光成功测定了大豆中提取的异黄酮总量。 　　3.2高压液相色谱法（HPLC）该方法能准确地检测出大豆中提取的异黄酮含量，对检测仪器的选择上也具有多样性。江和源等[11]以30：3.5：66.5的比例配制甲醇-醋酸-水作为流动相，通过ODS柱准确