生物化学讲义DNA的复制 修复和重组.ppt

保证复制忠实性的原因主要有以下三点: DNA聚合酶的高度专一性 严格遵循碱基配对原则。 DNA聚合酶的校对功能 错配碱基被3’-5’外切酶切除。 起始时以RNA作为引物 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 起始时以RNA作为引物的作用： DNA复制为什么要合成一个RNA引物，而后又把这个引物消除呢？这是保证DNA聚合过程高度精确的又一措施。已知DNA 聚合酶具有3??5?外切酶功能校对复制过程中的核苷酸，也就是说聚合酶在开始形成一个新的磷酸二酯键前，总是检查前一个碱基是否正确，这就决定了它不能从头开始合成。因此先合成一条低忠实性的多核苷酸来开始DNA的合成，并以核糖核苷酸来表示是“暂时”的，当DNA开始聚合以后再以5??3?外切酶的功能切除，以高忠实性的脱氧核苷酸取而代之，确保复制的忠实性。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 真核和原核DNA细胞复制比较 逆转录－RNA指导的DNA合成： 逆转录酶有3种酶的活性： ①依赖RNA的DNA聚合酶活力：合成DNA ②RNaseH活性：水解除去RNA-DNA杂合分子中的RNA ③依赖DNA的DNA聚合酶活性：以DNA为模板合成双链DNA 逆转录酶存在于所有致癌RNA病毒中，它的存在与 RNA病毒引起细胞恶性转化有关。 逆转录酶无校对功能，因此错误率较高，端粒酶就是一种逆转录酶。 逆转录酶的引物可以是寡DNA，也可以是RNA，但要有游离3’-OH末端。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 逆转录过程中cDNA的合成 依赖RNA的DNA聚合酶 核糖核酸酶H活力 依赖DNA的DNA聚合酶 第十六节 DNA的复制、修复和重组 §16.1 DNA的复制 §16.2 DNA的修复 §16.3 DNA的重组 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 DNA的损伤修复： 一些物理化学因子如紫外线、电离辐射和化学诱变剂均可引起DNA损伤，破坏其结构与功能。 然而在一定条件下，生物机体能使这种损伤得到修复。 紫外线可使DNA分子中同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体（TT），两个T以共价键形成环丁烷结构。CT、CC间也可形成少量二聚体（CT、CC），使复制、转录受阻。 细胞对DNA损伤的修复系统有五种： A、错配修复； B、直接修复； C、切除修复 D、重组修复； E、易错修复。 错配修复 Dam甲基化酶可使DNA的GATC序列中腺嘌呤N6位甲基化,通过是否甲基化，识别“新”和“旧”链， 需要DNA聚合酶Ⅲ和DNA连接酶。 Lynch综合症(遗传性疾病)----DNA错配修复缺陷造成。 直接修复 光复活是其一种方式，它分解紫外线引起的嘧啶二聚体，但哺乳动物没有。 切除修复 I、结构缺陷的修复；II、无嘌呤无嘧啶——碱基缺陷或错配 比较特殊的是靠DNA聚合酶Ⅰ和DNA连接酶填补完缺。 着色性干皮病----缺乏切除修复。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 重组修复： 遗传信息有缺损的子代DNA分子可通过遗传重组而加以弥补，即从同源DNA的母链上，将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处。然后再用合成的序列来补上母链的空缺。 此修复发生在复制之后，又称为复制后修复，在重组修复过程中，DNA链的损伤并未除去。 应急反应（SOS）和易错修复： 诱导修复是细胞DNA受到严重损伤或DNA复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的一系列诱导性修复。 SOS主要包括两个方面：增强DNA修复和抑制DNA聚合酶修复，使得DNA得以复制。 SOS反应是RecA蛋自和LexA蛋白相互作用引起的。并导致易错修复。 RecA的活性有三种：DNA重组活性、DNA单链结合、蛋白酶活性。 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 DNA的突变： DNA的突变的类型包括： A、碱基对的置换；B、移码突变 嵌入染料（EB等）造成移码突变。 人类癌症的发生是由于某些基因缺陷或变异所致。这些基因包括原癌基因和抑癌基因。 第十六节 DNA的复制、修复和重组 §16.1 DNA的复制 §16.2 DNA的修复 §16.3 DNA的重组 第三部分 分子生物学－信息途径 第三部分 分子生物学－信息途径 重组的三种类型： 同源重组 位点专一重组 转座（又称异常重组） 第三