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少林正骨精质量标准探究 摘要：目的研究少林正骨精的质量控制方法。方 法采用薄层色谱法对制剂中的独活、当归进行定性鉴别。 采用高效液相色谱法测定处方中血竭的有效成分血竭素的 含量，以乙M-0. 05 mol/L磷酸二氢钠溶液(50 : 50)为流 动相，检测波长为440 nmo结果定性鉴别的特征斑点清晰, 专属性强，阴性对照无干扰；血竭素在3. 997?43. 97 ng范 围内线性良好，加样回收率为101.26%(RSD=2.84%)o结论 定 性、定量方法准确可靠、重复性好，能有效控制少林正骨精 的内在质量。 关键词：少林正骨精；薄层色谱法；高效液相色谱法； 质量标准 D0I： 10. 3969/j. issn. 1005-5304. 2013. 11.021 中图分类号：R284. 1文献标识码：A文章编号： 1005-5304 (2013) 11-0056-03 少林正骨精收载于《卫生部药品标准?中药成方制剂》 第6册[1],由接骨仙桃草、当归、五加皮、独活、羌活、 三棱、血竭等20味药组成，具有活血祛瘀、消肿止痛、祛 风散寒的功效，用于跌打损伤、积瘀肿痛、腰肢麻木、风湿 骨痛。原标准中仅对冰片进行了定性鉴别，无含量测定项。 为了完善少林正骨精的质量标准，本试验对其质量标准进行 提高研究，建立主药当归、独活的薄层色谱鉴别方法及贵细 药材血竭中血竭素的高效液相色谱（HPLC）含量测定方法。 1仪器与试药 Agilent 1100高效液相色谱仪（美国惠普公司）,G1314A VWD紫外检测器；超声清洗器KQ-250型（昆山超声仪器有限 公司）；AX 205DR （十万分之一）电子天平（瑞士 METTLER TOLEDO公司）；H-HS数显恒温水浴锅（江苏金坛医疗器械厂）。 血竭素高氯酸盐对照品（批号0811-9302）、独活对照药 材（批号120940-200205 ）、当归对照药材（批号 120927-200310）,均由中国药品生物制品检定所提供；少林 正骨精（河南天地药业有限公司，批；乙睛为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂为分析 纯。 2方法与结果 2. 1定性鉴别 2. 1. 1独活 取本品5 mL,置10 mL量瓶中，加乙醇稀 释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取独活对照药材lg, 加乙醇10 mL,超声处理10 min,滤过，滤液作为对照药材 溶液。按处方配比去除独活，制成缺独活的阴性对照样品， 按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。照薄层色谱法 [2010年版《中华人民共国药典》（一部）附录VIB]试验，吸 取供试品溶液、对照药材溶液及阴性对照溶液各10 uL,分 别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙瞇（18： 3）为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。 供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜 色的荧光斑点，阴性对照无干扰[2-4] o 2. 1.2当归 取本品5 mL,置10 mL量瓶中，加乙醇稀 释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取当归对照药材0. 5 g, 加乙醇10 mL,超声处理20 min,滤过，滤液蒸干，残渣加 乙醇1 mL使溶解，作为对照药材溶液。按处方配比去除当 归，制成缺当归的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制 备阴性对照溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共国 药典》（一部）附录VIB]试验，吸取供试品溶液、对照药材 溶液及阴性对照溶液各10 PL,分别点于同一硅胶G薄层板 上，以环己烷-醋酸乙酯（9 : 1）为展开剂，展开，取出， 晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与 对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性 对照无干扰：5-7] o 2.2血竭素含量测定 2. 2. 1色谱条件 色谱柱：ZORBAX SB-C18柱（4. 6 mmX200 mm, 5 P m）；流动相：乙月青-0. 05 mol/L磷酸二氢 钠溶液（50 : 50）；流速：1. 0 mL/min；检测波长:440 nm； 柱温：40 °C；理论塔板数按血竭素计算应不低于4000[8-9] o 2. 2.2对照品溶液的制备 精密称取血竭素高氯酸盐对 照品6. 88 mg (血竭素质量二血竭素高氯酸盐质量/1.377), 置50mL棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液使溶解，并稀释至 刻度。精密吸取1 mL,置50 mL棕色量瓶中，加甲醇稀释至 刻度，摇匀，即得。 2. 2. 3供试品溶液的制备精密吸取本品5 mL,置具塞 锥形瓶中，精密加入3%磷酸甲醇溶液20 mL,称定质量，超 声处理(功率250 W,频率40 kHz) 10 min, 50?60 °(2水 浴保温1 h,放冷，称