生殖生物学理论与相关技术-20151217克隆技术.ppt

实验方法 常规核移植方法如图示 胚胎的激活 胚胎移植 胚胎经输卵管伞转移入输卵管内3cm处 分娩及护理 微卫星检测 DNA提取：采用UltrapureTM基因组DNA快速提取试剂盒。 微卫星检测：编号后由上海基康生物技术公司检测 SRY检测 引物（s5’GTGAAGCGACCCATGAACGCA3’, a 5’CGGGTATTTCTCCTGTGCAT3’ ）, 产物大小198bp MPF在细胞周期中的活性变化 3 供体细胞和受体细胞的细胞周期特点 供体细胞: 可能为G1, S, G2, M 胚胎细胞: 90%以上为S期 体细胞: 70%以上为G1/G0期 受体细胞: MⅡ期卵母细胞: 含有高水平的MPF a, 以MII期卵母细胞为受体时 MⅡ期卵激活前 激活后 MPF活性高 MPF活性低 所以：当受体处于MⅡ期时，只有当供体处于G1期时，克隆胚 胎才能保持正常的二倍体。 a1,当以胚胎细胞为供体时 问题: 胚胎细胞90%为S期，而不是G1期 策略: 用 aphidicolin或hydroxyurea处理, 使供体细胞停止在G1期. 结果: 克隆胚胎的发