检验医学及其仪器.ppt

通过流式细胞仪进行细胞分选主要是在对具有某种特征的细胞需进一步培养和研究时进行的。 4、细胞分选原理 细胞悬液形成液流柱 流动室振动 液流断裂成液滴 空白液滴 含细胞的液滴 弃去 偏转落入收集器 压电晶体 产生机械振动 不充电 充电 （一）分选基本原理 透射光谱法 透射光谱法就是把待测样品置于作用光与检测器之间，检测器所检测到的分析光是作用光通过样品体与样品分子相互作用后的光，若样品是透明的真溶液，则分析光在样品中经过的路程一定，透射光的强度与样品组分浓度由比耳定律决定。 反射光谱法 反射光谱分析时，检测器与光源置于待测样品的同一侧，检测器检测到的分析光是光源发出的作用光投射到物体后，以各种方式反射回来的光。物体对光的反射分为规则反射光（镜面反射）与漫反射。规则反射光指在物体表面按入射角等于反射角的反射定律发生的反射。漫反射是光投向漫反射体（颗粒或粉末）后，在物体表面或内部发生的方向不定的反射。 定性分析 近红外光谱定性分析利用模式识别与聚类的一些算法，主要用于鉴定。在模式识别运算时需要有一组用于计算机“学习”的样品集，通过计算机运算，得出学习样品在数学空间的范围，对未知样品运算后，若也在此范围内，则该样品属于学习样品集类型，反之则否定。聚类运算时不需学习样品集，它通过待分析样品的光谱特征，根据光谱近似程度进行分类。 定量分析 近红外光谱分析与其它吸收光谱按照比耳定律作定量分析类似。作常规光谱定量分析时，需要建立光谱参数与样品含量间的关系（标准曲线）。但对复杂样品作近红外光谱定量分析时，为了解决近红外谱区重叠与谱图测定不稳定的问题，必须充分应用全光谱的信息。 光谱分析仪器 紫外—可见光光谱仪 近红外光谱仪 红外光谱仪 电化学分析技术及其临床仪器 电化学分析法：利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。 2. 离子选择性电极：用特殊敏感膜制成的、对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。 3. 电解质分析仪：通常采用离子选择性电极（ISE）测定生物样品中离子浓度的仪器。 4. 血气分析仪：利用电极对人全血中的酸碱度（pH）、二氧化碳分压（PCO2）和氧分压（PO2）进行测定的仪器。 pH电极 电极对被测样本的反应，会在玻璃薄膜的内部与外部之间产生一个直流电压，该电压与内部缓冲液和样本的PH值差成正比，是由玻璃的金属离子与液体的氢离子[H＋]之间在膜面上的交换所产生的，该离子交换由液体中的[H＋]浓度所控制。 二氧化碳分压(PCO2)电极 PCO2电极是一种气敏电极。在电极的前端有一层半透膜。半透膜只允许某种特定的气体通过，而阻止其他的气体和离子通过。 PCO2电极工作原理图 CO2＋H2O←→H2CO3←→H＋＋HCO3－ 电极套中是一对测量 pH值的玻璃和参比电极。它们能将 pH值的变化测量出来。这样，测得的pH值便间接地反应了溶液中PCO2的高低。 PH＝-logPCO2 氧分压电极(PO2电极) 氧分压电极也是一种气敏电极。氧的测量是基于电解氧的原理而实现的。 在氧电极的阴极和阳极之间加有0.7V左右的极化电压。在极化电压的作用下，进入到电极套中的氧被电解。电极上所产生的反应为: 阳极反应：O2十2H2O十4e－→4OH－ 阴极反应：4Ag→4Ag＋一4e 此电解电流的大小正比于 PO2的高低。这样，通过氧电极的转换，PO2的高低便转换成了电流的大小。 血气分析仪的工作原理如图所示 电解质的工作原理图 自动生化分析技术和相关仪器 生化分析仪通过对血液和其他体液的分析来测定各种生化指标：如血红蛋白、胆固醇、肌肝、转氨酶、葡萄糖等，是临床诊断常用的重要仪器之一。 自动生化分析仪：是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告，以及实验后的清洗等步骤自动化的仪器。 生化分析的光学测定原理 许多化学物质具有颜色，有些无色的化合物也可以和显色剂作用，生成有色物质。 当有色溶液的浓度改变时，颜色的深浅也随着改变。浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。 生化分析即利用光电比色法分析标本中的各生化指标。 物质的颜色与光的吸收、透过、反射有关。 透明物质的颜色是其透过光波的颜色，不透明物质的颜色是其反射光波的颜色。 有色溶液对光的吸收是有选择性的。各溶液呈现不同的颜色，是因为溶液中的有色质点选择性地吸收某种颜色的光所致。实践证明，溶液所呈现的颜色是它的主要吸收光的互补色。 由于有色物质对光的吸收具有选择性，因此，在进行比色测定时，只能用光波中能被有色溶液吸收的那部分光线，即应用单色光进行比色测定