血红蛋白的提取和分离 课件.pptVIP

1.蛋白质分离和提取的原理： 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 一、基础知识 （一） 凝胶色谱法（分配色谱法） 2.凝胶： 大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）构成的多孔小球体，内部有许多贯穿的通道。 琼脂糖：用琼脂为原料经加工精制的大分子凝胶 根据被分离物质的蛋白质相对分子质量的大小，利用具有网状结构的凝胶，来进行分离。 1.概念： 3.凝胶色谱法分离蛋白质的具体过程 4.凝胶色谱法的原理 ①相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢; ②相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。 相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 进行体外实验时，如何保证蛋白质不会发生变性呢？ （二）缓冲溶液 能够抵制外界的酸和碱对溶液PH值的影响， 维持PH基本不变。 1.作用: 2.缓冲溶液的配制: 通常由1－2 种缓冲剂溶解于水 中配制而成。调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。 3. 在本课题中使用的缓冲液是:磷酸缓冲液, 成分：磷酸二氢钠与磷酸氢二钠 如何证明色谱法获得的蛋白质是目