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微柱凝胶技术检测在新生儿ABO溶血病的应用 林建锋(广东省云浮罗定市妇幼保健院检验科527200) 【中图分类号1R722.18【文献标识码】A【文章编号】1672-5085 (2013)04-0097-02 【摘要】 目的 采用微柱凝胶技术(MGT)进行新生儿溶血病(HDN-ABO)血清学 检测,对新生儿直接试验、游离试验、放散试验的结果进行分析。方法 采用微 柱凝胶技术对1089例疑为HDN的患儿进行检测，包括直抗试验、游离试验、放 散试验。结果 采用MGT法检查了 1089例疑为HDN的患儿送检血样，结果确诊 ABO血型系统HDN64例，阳性率5.88%,可疑HDN 26例朋性结果999例,3 项阳性的有15例，游离和放散试验均阳性的有49例，仅放散试验阳性的有64 例。结论 微柱凝胶技术用于新牛儿溶血病的检测，方法操作简单，使用方便, 标木用量少，敏感性高和特异性强，阴阳性结果明显，判断结果标准，结果易保 存等优点。可成为医院实验室常规检测方法。实验室能为临床快速准确提供试验 报告，有利于患儿的早期诊断、早期治疗，对提高新生儿健康水平有很重要的意 义。 【关键词】微柱凝胶技术 新牛儿溶血病(HDN-ABO) 微柱凝胶技术(MGT)是一种新的改良抗球蛋白试验技术，是近年发展起 来的一种新型免疫检测方法，在临床上己逐渐成为常规的红细胞血型血清学检测 技术，该技术已在国内、外应用于交叉配血、血型鉴定以及不完全抗体的测定。 我科于2009年1月至2012年1月，采用MGT对HDN-ABO进行了检测，收到良好 效果，报告如下： 1材料与方法 1.1样木：标木为我院新牛儿科1089例加生7d内疑为HDN患儿血样 1.2仪器与试剂 1.2.1仪辭：检验医学多功能离心机、免疫微柱孵育器(由中山市生科试 剂仪器有限公司生产)、台式低速离心机等 1.2.2试剂：抗人球蛋白检测卡、A、B、0标准红细胞（由中山市生科 试剂仪器有限公司生产） 1.3实验方法 1.3.1样本来源、要求2009年1月至2012年1月住在我院新生儿科 患儿（母亲是0型，患儿是A型或B型）出生后1?3天皮肤巩膜黄染，血红蛋白 降低，血清胆红素高于正常值，对患儿采集EDTA抗凝血3毫升共1089份标本， 本实验室对所送标本必须在接到后6小内检查完毕。 1.3.2样本准备 13.2.1放散液 标本离心，2000gtimes;10min,防止纤维蛋白干扰反应结果。取1?2ML 体积的压积血用盐水洗涤4次，最后一次尽量取净，然后和等量 的6%牛血清白 蛋H混匀，置于56°C孵育10分钟，期间摇动二次左右，迅速取岀2500rPm离心 2?3分钟，立即取上清。即热放散液。 13.2.2红细胞标本的制备 配制0.5%—1%红细胞生理盐水悬液。 1.3.3配套试剂 抗人球蛋白检测卡、标准红细胞A、B、Oo ［实验步骤］ 1.3.4游离试验和放散试验 1.3.4.1试剂卡室温平衡离心一次，标记编号。 13.4.2 1-3孔分别加入50UL新生儿血清,4?6孔分别加入50UL新生儿红 细胞放散液。 1.3.4.3将A型红细胞悬液50ul分别加入1号、4号；将B型红细胞悬 液50ul分别加入2号、5号；将0型红细胞悬液分别加入3号6号孔中。 1.3.4.4用专用孵育器37°C孵育15分钟。 1.3.4.5用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟?2500r/min3分钟）， 判定结果。 1.3.5直抗试验 1.3.5.1试剂卡室温平衡离心一次，标记编号。 13.5.2在其中一孔内加入患儿0.5%-1%红细胞生理盐水悬液50 mu;l” 使用专用离心机离心5 min, (900 r/min 2 min, 1 500 r/min 3 min),取出肉眼判定 结果。 1.4 [结果判定] 阳性结果：红细胞凝集在胶表面或胶中(结果大于等于1+),为阳性反 应 附表：新生儿溶血病血清学诊断标准 我科自2009年1月至2012年1月，采用MGT法检查了 1089例疑为HDN 的患儿送检血样，结果确诊ABO血型系统HDN 64例，阳性率5.88%,可疑HDN 26 例，阴性结果999例，3项阳性的有15例，游离和放散试验均阳性的有49例，仅 放散试验阳性的有64例。 3讨论 HDN起源于胎儿从父亲方面继承了一些母亲没有的红细胞抗原，这些 抗原遭到母亲免疫抗体的攻击，从而使胎儿红细胞遭到破坏，出现新生儿黃疸、 贫血、水肿、肝脾肿大，其至死胎、新生儿死亡等溶血病的症状和合并症⑵。 其中ABO血型系统所致的HDN最为常见，其次为Rh血型系统，Kelk MNS等血 型系统造成HDN者罕见。目前，在我国诊断新生儿溶血病的实验室检查主要是 三项试验(直接抗球蛋片试验、游离抗体试验、放散试验)[1],直抗阳性