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心肌疾病相关蛋白检验 黑龙江省哈尔滨市平房区人民医院(150060)邱 鸿 摘要： 血清肌红蛋白(Mb)存在于心肌与其他肌肉组织中，其分子量为17 500,血清肌红 蛋白是急性心肌梗死(AMI)患者升高的最早、标志物之一。血清肌红蛋白测定方 法有很多，由于分光光度法、电泳法及层析法不能测定低于微克水平的Mb,现 己不使用。免疫化学法较灵敏，但抗血清必须是对Mb特异的。 关键词： 心肌疾病 蛋白检查 一、血清肌红蛋白检验 血清肌红蛋白(Mb)存在于心肌与其他肌肉组织中，其分子量为17 500, 血清肌红蛋白是急性心肌梗死(AMI)患者升高的最早、标志物之一。血清肌红蛋 白测定方法有很多，由于分光光度法、电泳法及层析法不能测定低于微克水平的 Mb,现己不使用。免疫化学法较灵敏，但抗血清必须是对Mb特异的。放射免 疫试验灵敏度高，对流免疫电泳是一种定性方法，且灵敏度较低，不适宜检测心 肌梗死。乳胶凝集试验是个半定量试验，是用肉眼判断终点，具有一定的主观性， 而且一些含有高浓度类风湿因子的血清会产牛干扰。放射免疫试验灵敏度高，特 异性强，但使用放射性核素，现己少用。胶乳增强透射比浊法灵敏度高，特异性 好，测定速度快，适用于各型牛化自动分析仪，现己在临床上普遍釆用。 原理 Mb致敏胶乳颗粒是大小均一的聚苯丙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被 有兔抗人Mb抗体。样木中的Mb与胶乳颗粒表面的抗体结合后，使相邻的胶乳 颗粒彼此交联，发牛凝集反应产牛浊度。该浊度与样木中的Mb浓度呈正比，在 570 nm处测定吸光度，可计算样木中Mb的浓度。 试剂 1 ?试剂I甘氨酸缓冲液(pH9?0), NaN31. 0g/Lo 2?试剂致敏胶乳悬液，兔抗人MblgG致敏胶乳颗粒，NaN3、1. Og / Lo 3?Mb校准品。 （三） 操作 1 ?测定条件 温度：37°Co 波长： 570 nmo 比色杯光径：1?0 cm。 反应时间：5分钟。 （四） 计算 AA=A2-A1采用非线性多点定标模式，以不同浓度标准品的AA,绘制 校正曲线，测定管AA从校正曲线上查出测定结果。 （五）参考值 健康成年人肌红蛋白lt;70mu;g / Lc 建议各实验室根据自己的条件，建立本地的参考值。 （六）附注 本法适用于各种类型的半自动、全自动生化分析仪，严格按照仪器 说明书设定参数进行操作。 本法试剂应避光，于2?8°C可保存12个月，?20可保存更长时间， 但不宜反复冻融。 （七）临床意义 血清肌红蛋白是早期诊断AMI的敏感指标，在AMI发作后1?2小 吋，在患者血清中的浓度即迅速增加。6?9小时几乎所有的AMI患者Mb都升 高。Mb在血液中清除的速度很快，在发病24小时内可恢复到正常，所以连续 检测血清中的Mb,对评价患者在治疗期间是否有心肌梗死再次发生具有很重要 的意义。患者在发作后第丨天内血清肌红蛋白即可返冋到基线浓度，当有再梗死 吋，则又迅速上升，形成“多峰”现象，可以反映局部缺血心肌周期性自发的冠 脉再梗死和再灌注。 心脏外科手术患者血清肌红蛋白升高，可以作为判断心肌损伤程度 及愈合情况的一个重要客观指标。 在临床肌病研究中发现假性肥大型肌营养不良患者血清肌红蛋白也 升高。 二、血清肌钙蛋白检验 肌钙蛋白是肌肉收缩的调节蛋白，由3个结构不同的亚基组成，即肌钙 蛋白T(TnT)、肌钙蛋白l(Tnl闲肌钙蛋白C(TnC),它附在收缩的横纹肌细微组织上， Tnl是一种结构蛋白，它与肌动蛋白及原肌球蛋白互相作用。Tnl与肌动球蛋白在 静止状态吋相结合，抑制肌动球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有4个能结合 钙离子的结合点，当它与细胞内的钙离子结合吋，能导致整个肌钙蛋白构造上的 变化。肌钙蛋白放松了肌动球蛋讣肌动球蛋白与肌浆球蛋白互起作用，而造 成肌肉收缩。肌钙蛋白具有的3种同分异构体，其中两种同分异构体是骨骼肌所 特有的，一种同分异构体是心肌所特有的，这三种肌钙蛋白的同分异构体存在着 结构上的差异。心肌中的T和I亚基结构不同于其他肌肉组织，心肌钙蛋白T、 l(CTNI、CTNI)由于分子量小，分别为37 000和24 000,所以发病后血中浓度迅速 升高。 应用免疫层析与酶免技术可进行快速检测与定量测定，具有快速、灵敏、 特异的特点。但对于单个标本检查有不便之处。胶乳增强透射比浊法，目前已有 试剂盒供应，可在各型自动生化分析仪上使用，通用性强，已在临床上使用，不 同型号的生化分析仪应严格按照说明书设定参数和进行操作。 心肌钙蛋白T、I的快速检测 原理 应用免疫层析方法测定样品中的特异抗原(CTnl, CTnl)o测试吋 滴加血清样品于样品槽，样品通过毛细管效应沿试纸膜运动，如果样品中含有特 异抗原，试验部位就出现色带，在对照区域内应该有另一颜色条带作为实验对照。