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昆虫抗菌肽在农业上应用潜力 摘 要：综述了昆虫抗菌肽的分类、抗菌机制和在农业生 产中的应用，浅析了昆虫抗菌肽在农业生产中的优势和实用 发展潜力。 关键词：昆虫抗菌肽；抗菌机制；农业生产 中图分类号：Q966文献标识码：A DOI编码： 10. 3969/j. issn. 1006-6500. 2013. 03. 012 抗菌肽是具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性的小分子肽。 昆虫是世界上物种种群最多的生物，为适应多样的生活环 境，昆虫自身可形成独特的免疫系统，并自行分泌抗菌肽。 昆虫抗菌肽是最先被发现的一类抗菌肽，多带正电荷，水溶 性好，热稳定性强，无免疫原性，对宿主细胞具有选择杀伤 性，均为碱性多肽，N端为多聚腺昔酸残基，C端均酰胺化, 第二位氨基酸多为色氨酸(Try),具两亲性结构，分子量约 为4 kDa,可抗革兰氏阳性菌和阴性菌。 1昆虫抗菌肽的分类与结构 昆虫抗菌肽的分子量一般小于10 kDa,主要从鳞翅目 (Lepidoptera)、双翅目(Diptera)、鞘翅目(Coleoptera) 等中分离提取。根据其抗菌谱，昆虫抗菌肽分为：(1)抗革 兰氏阴性菌，即富含脯氨酸的抗菌肽(Proline-rich Peptides)和少数富含半胱氨酸的抗菌肽(Cysteine-rich Peptides )以及富含甘氨酸的抗菌肽(Glycine-rich Peptides)； (2)抗革兰氏阳性菌，通常多为富含半胱氨酸 的抗菌肽；(3)既抗革兰氏阳性菌又抗革兰氏阴性菌的无特 殊氨基酸结构的抗菌肽。 无特殊氨基酸结构的抗菌肽，如天蚕素(Cecropins), 广泛存在于家蚕、柞蚕等中。分子内部含有两性分子的a- 螺旋结构，具有保守氨基酸残基，但不含半胱氨酸和二硫桥。 富含半胱氨酸的抗菌肽，富含半胱氨酸，具有二硫桥， 广泛分布于半翅目、双翅目等中。如昆虫防御素(Thanatin) 分子内部含有两性分子的ci-螺旋和二硫桥，且二硫桥在抗 菌过程中起到关键作用。 富含脯氨酸的抗菌肽多在双翅目、半翅目、鞘翅目、膜 翅目等中发现，由约15?34个氨基酸残基组成，脯氨酸含 量占25%以上。如蜜蜂血淋巴中的Aptdaecin,其氨基酸组 成成分中，脯氨酸含量高达33%。 富含甘氨酸的抗菌肽多分布于鳞翅目、膜翅目等中，具 有0-糖基化。如来自Gloverins家族的抗菌肽，其一级结构 富含大量甘氨酸，且位置高度保守，无半胱氨酸，热稳定性 好。 2抗菌肽的抗菌机制 目前，抗菌肽的作用机制可根据作用对象的类型分为： 抗真菌型、抗细菌型和抗病毒型。 2.1抗真菌活性作用机制 Histatin 5是从人体唾液中提取出的具有抗真菌活性的 多肽。Helmerhors等［1］研究发现,Histatin 5为阳离子肽, 主要以a-螺旋结构或B-折叠形式存在，具有两亲性。由 于碱性抗菌肽所带的正电荷与线粒体膜上的负电荷通过静 电作用互相吸引,Histatin 5能作为线粒体引导肽的类似物 与线粒体膜结合，且不依赖于线粒体膜表面的蛋白，因为碱 性抗菌肽和膜负电势的因素，与线粒体结合造成线粒体膜渗 透势改变，线粒体破裂，真菌死亡。 2.2抗细菌活性作用机制 肽分子并不是插入膜内，而是与质膜外小叶表面的局部 连接。抗菌肽可通过氨基降低菌体膜的通透性和膜电势差， 进而导致细胞内容物的泄漏，最终致使菌体细胞发生裂解 ⑵。 潘凌子等［3］通过电子显微镜观察发现，穿膜孔洞模型 的作用机制是由于抗菌肽（如蜂毒肽）能够引起菌体细胞穿 孔或破裂，导致细胞质外流，从而使菌体发生裂解，最终死 亡。 非膜裂解型的作用机制主要包括抑制细胞呼吸、生物大 分子的合成及细胞壁的合成等。 Carlsson等［3］研究发现，40 nmol - L-1昆虫防御素 即可导致细菌细胞呼吸变弱，6 h后呼吸完全停止，这表明 昆虫防御素是通过抑制细菌的呼吸作用来产生抗菌效果的 ［4］。而蜂毒肽除了能够诱导细菌细胞形成穿膜孔洞，还能 够抑制菌体与调控细胞分裂相关的蛋白合成，促使细胞分裂 停滞于I期(或G1期)，进而影响细胞分裂。樗蚕素 (attacin)可通过干扰大肠杆菌胞外膜蛋白OmpC、OmpF、 OmpA和LamB基因的转录，从而抑制胞外蛋白的合成，最终 改变细菌，尤其是革兰氏阴性菌细胞膜的通透性，导致菌体 死亡［5］ o 麻蝇毒素II (SarcotoxinsII )由于无法维持正在形成 中的细胞壁的正常形态，进而抑制细胞壁的形成，因此具有 抗菌功效。麻蝇毒素II对已形成的细胞壁则无任何影响［6］。 3抗病毒活性作用机制 抗菌肽的抗病毒活性作用机制是利用抗菌肽与病毒蛋 白具有相似性，从而阻止病毒对植物的侵染。如蜂毒肽及类 似物K17的结构与烟草花叶病毒的衣壳蛋白的部分氨基酸序 列存在相似性，以伪装病毒包被蛋