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微生物学检验第八章 革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定返回总目录第三节 弧菌科第四节 其他革兰阴性苛养菌第一节 肠杆菌科第二节 非发酵革兰阴性杆菌2314本 章 内 容学习目标及重点学习目标: 1.掌握:肠杆菌科的共性及常见细菌的微生物检验;非发酵菌革兰阴性杆菌的共同特性;铜绿假单胞菌生物学性状、微生物学检查及临床意义;霍乱弧菌主要生物学特性;临床常见革兰阴性苛养菌的微生物学检验方法2.熟悉:肠杆菌科细菌的临床意义;不动杆菌属和产碱杆菌属生物学性状、微生物学检查及临床意义;霍乱弧菌微生物常规检验程序和方法3.了解:莫拉菌属等其他非发酵革兰阴性杆菌生物学性状、微生物学检查及临床意义;副溶血性弧菌的主要生物学特性,微生物学常规检验方法;临床常见革兰阴性苛养菌的生物学特性1.肠杆菌科常见菌属的鉴定、血清学诊断,与非发酵菌、弧菌科的鉴别2.铜绿假单胞菌、霍乱弧菌鉴定要点本章重点: 第一节 肠杆菌科概 述是栖居在人和动物的肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌通过粪—口途径进行传播,引起肠道感染或肠外感染广泛分布在自然界中,包括植物、土壤、水以及人和动物的肠道中,多数是正常人肠道菌群的正常菌群,可引起医院感染。条件致病菌临床可查到四十种以上 第一节 肠杆菌科致病菌肠道正常菌群条件致病菌医院感染 肠杆菌科细菌包括:——埃希菌属——志贺菌属——沙门菌属——耶尔森菌属——变形杆菌属——克雷伯菌属——摩根菌属——枸橼酸菌属——肠杆菌属——沙雷菌属等 第一节 肠杆菌科肠杆菌科共同特点形态结构 G-小杆菌,无芽孢,多数有鞭毛及菌毛培养特性 需氧或兼性厌氧营养要求不高,普通培养基可生长,菌落相似,形成灰白色中等大小,S型菌落,常用肠道选择培养基培养氧化酶阴性,发酵葡萄糖,硝酸盐还原实验阳性 第一节 肠杆菌科肠杆菌科细菌鞭毛染色及电镜下形态乳糖大肠埃希菌(非致病菌)产酸发酵形成紫蓝色金属光泽化合物伊红美兰结合选择作用(弱选)有色的乳糖发酵菌落乳糖伤寒沙门菌等(致病菌)伊红美兰不能结合不发酵无色的乳糖不发酵菌落 第一节 肠杆菌科EMB(伊红——美兰培养基)大肠埃希菌 产酸 桃红色乳糖发酵菌落 第一节 肠杆菌科乳糖发酵中性红呈红色选择抑制作用(强选)SS培养基(沙门志贺培养基)(含营养物、鉴别乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂)乳糖不发酵胆盐、煌绿:抑制大肠埃希菌及G+菌,提高肠道致病菌检出率伤寒沙门菌 无色乳糖不发酵菌落 第一节 肠杆菌科生化反应: 活跃,常用于鉴别肠道杆菌。发酵葡萄糖产酸或产酸产气,氧化酶(-),触媒(+),还原硝酸盐抵抗力:不强。耐受胆盐,抵抗多种染料的抑菌作用抗原结构:菌体(O)抗原鞭毛(H)抗原表面(K、Vi)抗原易出现各种变异:耐药性(重要) 第一节 肠杆菌科初步鉴定到科的特征葡萄糖发酵(+)硝酸盐还原(+)氧化酶(-)触酶(+)痢疾志贺菌除外结合血清学鉴定到属、种(型)氧化酶试验阳性:紫红色 阴性:无色硝酸盐还原试验阳性:红色 阴性:淡黄色 一、埃希菌属(Escherichia)大肠埃希菌镜下形态(上—革兰染色、鞭毛染色,下—电镜观察)(一)生物学特性形态染色:符合肠杆菌特点,周鞭毛菌,有菌毛培养特性:符合肠杆菌特点 EMB——紫黑色有金属光泽 S-S——桃红色生化反应:IMViC(++--),见教材表格。抗原O 抗原( O1---O173)H 抗原(H1---H56)K 抗原(K1---K100)血清型表示法:O:K:H20(一)生物学特性EMB平板上的E.coli大肠埃希菌菌落特征(MAC)(一)生物学特性大肠埃希菌KIA(AA+-)MIU(++-)(一)生物学特性大肠埃希菌IMViC试验(++--)右侧为对照(--++) 发酵型氧化型产碱型埃希菌属鉴定特征靛基质(+)甲基红(+)枸橼酸盐(-)尿素(-)发酵多种糖产酸产气肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别 (二)临床意义1.致病物质除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外,大肠埃希菌具有独特的毒力因子有:黏附素——具有高度特异性 吸附、定植、致病外毒素(由ETEC产生的肠毒素) 不耐热肠毒素(heat labile toxin,LT),加热 65℃、30分钟即被破坏; 耐热肠毒素(heat stable toxin,ST),100℃、20分钟仍不被破坏,LT和ST均可使肠道细胞中cAMP的水平升高,引起肠液大量分泌而导致腹泻(二)临床意义2.所致疾病:肠道外感染(内源性感染)1.化脓性感染——定位转移腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等2.泌尿道感染——病原菌来自病人肠道(上行性)占泌尿道感染首位、女性多见(尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等)引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致
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