酶工程讲义课件.ppt

* * 3、交联法 利用双功能或多功能试剂,使酶分子之间或酶蛋白与其它惰性蛋白之间发生交联,凝聚成网状结构,对酶行固定。戊二醛是应用最广泛的双功能试剂 * * * * 六、酶工程的应用 酶工程的应用主要集中于食品工业、轻工业以及医药工业中。 另外在环境保护、能源开发上也有应用。 * * 应用一：酶法生产高果糖酱 1：为什么要生产高果糖酱 果糖的甜度是葡萄糖的1.7倍，而且甜味纯正 * * 2：需要用到的酶：淀粉酶、糖化酶、葡萄糖异构酶等 3：工艺流程示意图 * * 应用二、酶法合成丙烯酰胺合成 1传统的丙烯酰胺合成生产及其缺点 传统丙烯酰胺合成合成：丙烯 腈与丙酮在催化剂浓硫酸 缺点：反应物浓度低，转化率低，反应物中残留金属铜合丙烯腈，影响产品质量 2 酶法合成丙稀酰胺 腈水合酶催化 条件温和、产率高，没有副产物 3. 酶法合成 * * 应用三：酶法生产L-氨基酸 1 氨基酸的用途： 人体必须氨基酸：赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苏氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸 补充营养和治疗某些疾病 增味剂和畜禽的饲料 高分子材料：聚赖氨酸 * * 化学合成——酶拆分方法 氨基酸酰化酶 1969 年，该酶被固定在DEAE-葡聚糖载体上，是世界上第一个固定化酶。 * * 3 、酶法工艺生产L-氨基酸 * * 应用四 酶法合成、半合成抗生素生产的重要中间体 1、酶法的好处： 发酵法存在一些缺点：抗菌谱窄、副作用大等。 而酶法则可生产抑制耐药性和新型广谱抗生素 * * β-内酰胺环是青霉素的有效成分，若对青霉素分子进行改造，可通过三种途径，即更换侧链、改造羧基和改造母核，一般第一种较多。 * * 2、合成过程：青霉素酰化酶 * * 作业 酶作为生物催化剂有哪些特性 请简单列出微生物发酵生产酶制剂的工艺过程。 * Thank you! * * * 酶工程 * * 酶催化反应机理及反应动力学 * * （二）酶的催化反应机理 1 酶的活性中心 指酶分子中直接和底物结合，并和酶的催化作用直接有关的部位。 （1）结合基团：与S结合的基团。 （2）催化基团：直接参与催化反应的基团。 酶的活性部位，不仅决定酶的专一性，同时对E的催化性质起决定作用。 活性部位的基团都是必需基团，必需基团还包括活性部位以外的，对维持空间构象必需的基团。 * * * * * * 2 关于酶与底物分子结合的假说 （1）.中间络合物学说：底物先与酶结合成不稳定的中间络合物，然后再分解释放出酶与底物 证实：H2O2 + 过氧化物酶 （H2O2 —过氧化物酶） （ 褐色） （ 红色） 645\587\548\498nm 561\550nm （H2O2 —过氧化物酶）+ AH2 过氧化物酶 + A + 2H2O （ 红色） （ 褐色） * * （2）锁－钥匙学说：1890年Fisher提出。 该学说认为酶的天然构象是刚性的，如果底物分子结构上存在着微小的差别，就不能契入酶分子中，从而不能被酶催化。 * * （3）诱导－契合假说:Koshland提出 当酶分子与底物接近时，酶蛋白受底物分子的诱导，其构象发生了有利于底物结合的变化，酶与底物在此基础上互补楔合，进行反应。 * * * * （三）酶催化反应的速率理论 基础知识： 在反应体系中，任何反应分子都有进行化学反应的可能，但只有能量达到或超过某一限度（能阈）的活化分子，才能在碰撞中起化学反应。 能阈——活化能：活化分子处于活化态，活化态与常态的能量差，也就是分子由常态转变为活化态所需的能量称为活化能。 达到或超过能阈的分子——活化分子 活化分子越多——反应速度越快。 提高活化分子数量的途径 ①对反应体系加热，照射 ②降低活化能 * * 2. 酶高效催化的理论 酶催化能够降低活化能，是非酶催化1/3以下。 * * （1）邻近和定向效应 （2）酸碱催化 （3）张变和扭曲效应 （4）共价催化 （5）多元催化与协同效应 * * （四）酶催化反应动力学 1 概念 热力学：研究一个反应能否进行，进行的程度（反应物转化成产物的多少），只考虑始态、终态，不考虑历程（如何反应）。 化学动力学：研究（1）反应速度（2）反应条件对速度的影响（3）反应步骤（4）反应机理（以便估价、控制、应用）。 酶促反应动力学：研究酶促反应的速度和影响此