实时荧光定量PCR法测定has-miR-429、has-miR-127—3p及has-miR127—5p在不同HPV感染的宫颈癌细胞中的表达.pdfVIP

中国卫生检验杂志 2013年9月第23卷第 12期 ChinJHealthLabTec，Sep2013，Vol23，No12 ·2635· · 临床检验 · 实时荧光定量 PCR法测定 has—miR一429、 has—miR一127—3p及 has—miR127—5p在不同 HPV感染的宫颈癌细胞 中的表达 姚婷婷 ，刘秀婷 ，张定梅。，禹夜 ，林仲秋 1．中山大学孙逸仙纪念医院妇产科 ，广东 广州 510120；2．中山大学基础医学院，广东 广州 510089； 3．中山大学公共卫生学院，广东 广州510089 摘要：目的 探讨 has—miR一429、has—miR一127—3P及has—miR127—5P在不同宫颈癌细胞中的表达水平。方法 用 SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株，提取和纯化mRNA，逆转录成cDNA，在测定最佳反应条件后，采用实时荧光 定量 PCR技术测定 has—miR一429、has—miR一127—3p及has—miR127—5p的表达情况，结合内参 U6进行相对定量 分析。结果 miR一429、miR一127—3p及 miR127—5p在 SiHa细胞相对于 Hela细胞表达为 (0．0031±0．0002)， (59．37864-3．7024)和(0．0524-40．0148)，相对于C33A细胞表达为 (0．0059-40．0005)，(15．5625-41．2780)和 (0．0334 -40．0103)。结论 has—miR一429、has—miR一127—3p及 has—miR127—5p可能与宫颈癌的HPV感染相关。 关键词：微小RNA：SiHa细胞 ；Hela细胞；C33A细胞；实时荧光定量PCR 中图分类号：R373．33 文献标识码 ：B 文章编号：1004—8685(2013)12—2635—04 Theexpression0fhas—miR -429．has—miR 一127-3pandhas—miR127-5p in difierentcervicalcancercellswithHPV infectionbyreal—timePCR YAO Ting—ting ，LIU Xiu—ting，ZHANG Ding—mei，YU Ye，LIINZhong—qiu DepartmentofGynecologyandObstetrics，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China Abstract：Objecfive Toinvestigatetheexpressionlevelsofhas—miR一429，has—miR一127—3pandhas—miR127—5pin variouscerviealcancercells．M ethods Has—miR一429．has—miR 一127—3pandhas—miR127— 5pweredeterminedby real—timequantitativePCR inthreekindsofeerviealcancercelllines。SiHa。HelaandC33A．Inaddition．U6asintemalref- erencewasusedforrelativequantitativeanalysis．Results RelativetoHela．theexpressionofMiR一429．miR一127—3pand miR127—5pinSiHaeeUswere(0．0031-40．0002)，(59．3786-43．7024)and(0．0524 ±0．0148)，whilerelativetothe C33Acell，山eywere(0．0059-40．0005)。(15．5625-4 1．2780)and(0．0334 -40．0103)．Conclusion Has—