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第25课时 基因工程及其应用
ks5u目标导读] 1.结合教材图文,概述基因工程的基本原理和基本步骤。2.结合具体实例,了解基因工程的应用及其安全性。
ks5u重难点击] 基因工程的基本原理和基本步骤。
1.基因是有遗传效应的DNA片段,由于DNA分子具有多样性和特异性,因此基因是多种多样的,其中的脱氧核苷酸的排列顺序就是遗传信息。
2.中心法则揭示了生物遗传信息由DNA向蛋白质传递与表达的过程。
(1)a、b、c、d所表示的四个过程依次分别是复制、转录、翻译、逆转录。
(2)真核生物中,过程a的主要场所是细胞核,过程b的原料是4种核糖核苷酸。
(3)在不同的生物体内,同一种mRNA经过c过程产生的蛋白质中的氨基酸排列顺序是相同的,因为所有生物共用一套遗传密码。
3.基因对性状的控制方式及实例
(1)直接途径:基因控制,蛋白质的结构控制,生物体的性状,如镰刀型细胞贫血症、囊性纤维病的病因。
(2)间接途径:基因控制,酶的合成控制,细胞代谢控制,生物体的性状,如白化病、豌豆的粒形。
课堂导入
科幻电影《蜘蛛侠》中的男主角意外被转基因的蜘蛛咬伤,蜘蛛的基因整合到了他的基因上,并且在他体内表达,从而使他成了具有特殊本领的超级英雄。现实中,我们已经运用类似的技术来改造生物的性状,获得人们所需要的品种,这就是基因工程。
探究点一 基因工程的原理
基因工程是在分子水平上改造DNA分子,需要特殊的工具和操作步骤,分析下列问题。
1.基因工程的概念
(1)基因工程,又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
(2)基因工程是把一种生物的某种基因转移到另一种生物体的细胞内,基因的结构基本没有变化,只是位置发生了变化,所以应该属于基因重组。
2.基因工程的基本工具
(1)限制性核酸内切酶
在大肠杆菌中,有一种叫做EcoRⅠ的限制酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开。如图所示:
可见,限制性核酸内切酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,形成2个黏性末端。
小贴士 限制酶切割的是脱氧核苷酸之间的化学键,不是碱基之间的氢键;切割后不一定都产生黏性末端,也可能产生平末端。
(2)DNA连接酶
同种限制酶切割不同DNA分子后形成的黏性末端是可以通过碱基互补配对连接起来的,但是脱氧核糖和磷酸之间的缺口要靠DNA连接酶进行连接。
(3)运载体
①作用:将外源基因送入受体细胞。
②种类:质粒、噬菌体和动植物病毒等。质粒存在于许多细菌以及酵母菌等生物细胞中(如图),是拟核或细胞核外能够自主复制的很小的环状DNA分子。上面通常含有的抗性基因可以作为标记基因用于目的基因导入受体细胞的检测依据。
3.基因工程的操作步骤
结合教材图6-6归纳:
eq \x(提取目的基因)——目的基因:人们所需要的特定基因
↓
目的基因与运载体结合eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(用某种限制酶切割质粒,用同一种限制酶切割目的基因,加入DNA连接酶,质粒和目的基因结合形成重组DNA分子))
↓
将目的基因导入受体细胞:主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的方法
↓
目的基因的检测与鉴定eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(检测:根据受体细胞中是否具有标记基因,, 判断目的基因是否导入受体细胞,表达:受体细胞表现出特定的性状,如棉花, 抗虫性状的表现))
(1)DNA解旋酶和限制酶都作用于DNA,试分析这两种酶的作用部位相同吗?
答案 不相同。DNA解旋酶作用于碱基之间的氢键,而限制酶作用于磷酸与脱氧核糖之间的化学键,即磷酸二酯键。
(2)切割运载体和目的基因为什么常用同一种限制酶?
答案 因为只有用同一种限制酶才能切割出相同的黏性末端,利于目的基因与运载体结合。
(3)限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同吗?
答案 相同,均作用于磷酸二酯键。
(4)若用DNA连接酶将目的基因与运载体两两结合时,可能有哪些产物?
答案 产物可能有三种:目的基因与目的基因结合、运载体与运载体结合、目的基因与运载体结合。
(5)目的基因能够在受体细胞中表达的基础是什么?
答案 所有生物共用一套遗传密码。
归纳提炼
基因工程操作中应注意的问题
(1)四个步骤中只有第三步将目的基因导入受体细胞不涉及碱基互补配对。
(2)目的基因必须与运载体结合后才能导入受体细胞,才能稳定地保存,并进行复制。
(3)受体细胞常用微生物的原因:繁殖快、代谢快、目的产物多。
(4)培育转基因动物,受体细胞一般选用受精卵。
活学活用
1.某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a,通过基因工
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