影响分离的因素与操作条件选择.ppt

第七章高效液相色谱分析法 * 7.4.1 影响分离的因素 1. 影响分离的因素与提高柱效的途径 液体的扩散系数仅为气体的万分之一，则在高效液相色谱中,速率方程中的分子扩散项B/u较小，可忽略不计，即： H = A + C u 液体的黏度比气体大100倍，密度为气体的1000倍，故降低传质阻力是提高柱效主要途径。 粒度较大时的LC曲线。 * 由速率方程，降低固定相粒度可提高柱效。 液相色谱中，不可能通过增加柱温来改善传质。分离过程需要保持恒温。 改变淋洗液组成、极性是改善分离的最直接的因素。 载体粒度较大时的LC曲线。 载体粒度较小时的LC曲线。 * 2.流速 流速是调整分离度和出峰时间的重要可选择参数。 3.固定相及分离柱 气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。 * 7.4.2 分离类型选择 * 7.4.3 HPLC的应用 1. 环境中有机氯农药残留量分析 可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。 固定相：薄壳型硅胶(37 ～50?m) 流动相：正己烷 流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm?2.5mm(内径) 检测器：示差折光检测器 * 2. 稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。 固定相：十八烷基硅烷化键合相 流动相：20%甲醇-水 ～100%甲醇 线性梯度淋洗，2%/min 流 速：1mL/min 柱 温：50 oC 柱 压：70 ?104 Pa 检测器：紫外检测器 * 3. 血浆分析 * 7.4.4 制备型液相色谱 获得高纯物质（色谱纯）的有效方法。 半制备柱（内径8mm，长度15 ～ 30cm），一次制备量0.1～１mg。 1.色谱柱的柱容量（柱负荷） 对分析柱：不影响柱效时的最大进样量； 对制备柱：不影响收集物纯度时的最大进样量； 超载：进样量超过柱容量。柱效迅速下降，峰变宽。 超载可提高制备效率，以柱效下降一半或容量因子k降低10%为宜。 * 2. 液相制备色谱的方法 （1）主峰可获得良好分离；使用制备柱，超载提高效率。 （2）两主成分之间的小组分； 超载，分离切分使待分离组分成为主成分（富集）后，再次分离制备。 * 3. 制备型液相色谱 制备型液相色谱：结构与分析型一样，但泵流量大，进样量大，采用制备柱，柱后有馏分收集器。 制备柱：内径20～50mm，柱长50cm。 * 请选择内容 结束 7.1 高效液相色谱的特点与仪器 7.2 基本原理与主要分离类型 7.3 固定相与流动相 7.4 影响分离的因素与操作条件选择 7.5 离子色谱法 -刘志广-