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- 2019-09-07 发布于湖北
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二、着丝粒作图(centromere mapping) 利用四分子分析法,测定基因与着丝粒间的距离。 1、原理: 染色体作图的依据:在非姐妹染色单体间没有发生着丝粒和基因间交换的减数分裂,称第一次分裂分离(first-division segregation)或叫M1模式分离。下图 若发生了交换,称第二次分裂分离(second-division segregation)或称M2模式分离。图 第一次分裂分离 第二次分裂分离 2、重组值的计算 野生型——记为lys+,成熟子囊孢子呈黑色; 突变型——记为lys-,子囊孢子成熟较迟,呈灰色。 用不同接合型的lys+和lys-杂交,可预期八个孢子中lys+和lys-呈4:4的比例,事实也是如此。 六种子囊孢子排列方式 六种子囊孢子排列方式 表3-7粗糙脉孢菌+X-杂交子代子囊类型 (1) (2) (3) (4) (5) (6) 子 囊 类 型 + + - - - - + + + - + - - + - + + - - + - + + - 子囊型 105 129 9 5 10 16 分裂类型 M1 M1 M2 M2 M2 M2 未交换型 交换型 第一次分裂分离与第二次分裂分离 (1-2)两种排列方式:野生型lys+和突变型lys-在 M1彼此分离,称第一次分裂分离。 着丝粒和lys基因位点间不发生非姊妹染色单体交换,因此这两种子囊类型就是非交换型子囊。 (3-6)四种排列方式:第一分裂产物中野生型与突变型未发生分离,野生型和突变型 M2发生分离,称第二次分裂分离。 着丝粒与基因位点间发生非姊妹染色单体交换,因此这四种子囊均为交换型子囊。 着丝点作图 每个交换型子囊中,基因位点与着丝粒间发生一次交换,其中半数孢子是重组型(重组型配子)。因此,交换值(重组率RF)的计算公式为: RF 0-lys = (9+5+10+16) ×1/2 / (105+129+ 9+5+10+16) × 100% =7.3% 即着丝粒与 lys 间的距离为7.3c 三、链饱霉的连锁 两对基因的重组: 利用两个不同交配型进行杂交 nic + × + ade nic(nicotinic acid)为菸(烟)酸依赖型, ?ade(adenine)腺嘌呤依赖型。 两对基因杂交,可产生6×6种不同的子囊型,如果不考虑半个子囊内的基因型次序,可以把36种子囊型归纳为7种不同的子囊型。因为我们感兴趣的只是第一、二次减数分裂的分离及基因之间的重组,而与分离的方向无关。这只不过是着丝粒的随机趋向而已。 子囊型 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) 基因型次序 + ade + ade nic + nic + 2 + + + + nic ade nic ade 2 + + + ade nic + nic ade 8 + ade nic ade + + nic + 8 + ade nic + + ade nic + 4 + + nic ade + + nic ade 4 + + nic ade + ade nic + 8 7种基本子囊 中,每一种必包函的排列种类 (1)2×1×1=2; (2)2×1×1=2; (3)2×2×2=8; (4)2×2×2=8 (5)1×2×2=4; (6)1×2×2=4; (7) 2×2×2=8 (1)+(2)+…+(7)=36 子囊型 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) 基因型次序 + ade + ade nic + nic + + + + + nic ade nic ade + + + ade nic + nic ade + ade nic ade + + nic + + ade nic + + ade nic + + + nic ade + + nic ade + + nic ade + ade nic + 分离发生的时期 M1 M1 M1 M1 M1 M2 M2 M1 M2 M2 M2 M2 M2 M2 子囊型分类 PD NPD T T PD NPD T 实得子囊型数 808 1 90 5 90 1 5 nic+×+ade,得到7种基本子囊型 子囊型分类: (1)亲二型(PD,parental ditype),两种基因型与亲代相同。包括(1),(5)。 (2)非亲二型(NPD,non-parental ditype),两种基因型都和亲代不一样,都是重组型。包括(2),(6)。 (3)四型(T,tetratype):四种基因型,两种与亲代相同,两种与亲代不同,有一半发生了重组。包括(3),(4),(7)。 考虑两对基因间是否发
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