化妆品中10种α-羟基酸的检测方法.doc

附件8 化妆品中10种α-羟基酸的检测方法 Determination of 10 α-hydroxy acid in cosmetics 1 范围 本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中α-羟基酸的含量。 本方法适用于水剂、膏霜乳液化妆品中α-羟基酸含量的测定。 本方法所指的α-羟基酸包括葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、扁桃酸、二苯乙醇酸和羟基辛酸。 2 方法提要 以水提取化妆品中葡糖醛酸等10种α-羟基酸组分，用高效液相色谱仪进行分析，以保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量。 本方法中10种α-羟基酸的检出限、定量下限及取样量为1g时检出浓度和最低定量浓度见表1。 表1 10种α-羟基酸的检出限、定量下限和检出浓度、最低定量浓度 α-羟基酸 组分 检出限 （μg） 定量下限 （μg） 检出浓度 （μg/g） 最低定量浓度 （μg/g） 葡糖醛酸 0.08 0.24 150 450 酒石酸 0.03 0.09 60 180 羟基乙酸 0.02 0.06 40 120 苹果酸 0.02 0.06 40 120 乳酸 0.05 0.15 100 300 柠檬酸 0.02 0.06 40 120 2-羟基丁酸 0.04 0.12 80 240 扁桃酸 0.001 0.003 2 6 二苯乙醇酸 0.001 0.003 1 3 羟基辛酸 0.02 0.06 40 120 3 试剂和材料 除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。 3.1 磷酸氢二铵，分析纯。 3.2 磷酸，优级纯。 3.3 甲醇，色谱纯。 3.4 标准物质：10种α-羟基酸标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号列于表2。 3.5 混合标准储备溶液：分别精密称取（精确到0.0001g）葡糖醛酸400mg、酒石酸200mg、羟基乙酸400mg、苹果酸400mg、乳酸500mg、柠檬酸400mg、2-羟基丁酸500mg、扁桃酸10mg、二苯乙醇酸10mg和羟基辛酸400mg于同一50mL容量瓶中，加水40mL，60℃超声15min使溶解，用水定容，配制成混合标准储备溶液。 表2 10种α-羟基酸中文名称、英文名称、CAS登录号、 分子式、相对分子质量 序号 中文名称 英文名称 CAS登录号 分子式 相对分子质量 1 葡糖醛酸 Glucuronic acid 6556-12-3 C6H10O7 194.14 2 酒石酸 Tartaric acid 87-69-4 C4H6O6 150.09 3 羟基乙酸 Glycolic acid 79-14-1 C2H4O3 76.05 4 苹果酸 Malic acid 97-67-6 C4H6O5 134.09 5 乳酸 Lactic acid 79-33-4 C3H6O3 90.08 6 柠檬酸 Citric acid 77-92-9 C6H8O7 192.12 7 2-羟基丁酸钠 DL-2-Hydroxybutyric Acid Sodium 5094-24-6 C4H7NaO3 126.09 8 扁桃酸 Mandelic acid 90-64-2 C8H8O3 152.15 9 二苯乙醇酸 Benzilic acid 76-93-7 C14H12O3 228.24 10 羟基辛酸 Hydroxycaprylic acid 617-73-2 C8H16O3 160.21 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。 4.2 天平。 4.3 超声波清洗器。 4.4 水浴锅。 4.5 高速离心机。 4.6 pH 计。 4.7 涡旋振荡器。 5 分析步骤 5.1 混合标准系列溶液的制备 分别精密移取不同体积的混合标准储备溶液（3.5）于10mL容量瓶中，用水定容，配制成浓度如表3所示的混合标准系列溶液。 表3 10种α-羟基酸的标准系列浓度 α-羟基酸 组分 葡糖 醛酸 酒石酸 羟基 乙酸 苹果酸 乳酸 柠檬酸 2-羟基丁酸 扁桃酸 二苯乙醇酸 羟基 辛酸 混合标准系列溶液，mg/L 100 50 100 100 125 100 125 2.5 2.5 100 200 100 200 200 250 200 250 5 5 200 400 200 400 400 500 400 500 10 10 400 800 400 800 800 1000 800 1000 20 20 800 2000 1000 2000 2000 2500 2000 2500 50 50 2000 4000 2000 4000 4000 5000 4000 5000 100 100 4000 5.2 样品处理 称取样品1g（精确到0.00