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神经干动作电位的引导传导速度测定和不应期的观察 实验目的 掌握离体神经干动作电位的细胞外记录法及其基本波形的判断和测量。 掌握神经干动作电位传导速度及其不应期的测定方法。 基础知识 动作电位的记录方法 细胞内记录(extracellular recording) 细胞外记录(intracellular recording) 图示胞内记录法和动作电位波形 细胞外记录法 双相动作电位(biphasic action potential) 单相动作电位(monophasic action potential) 图示细胞外记录法和动作电位形态 基础知识 用电刺激神经,在刺激电极的负极下神经纤维膜内产生去极化,当去极化达到阈电位,膜上产生一次可传导的快速电位反转,即动作电位 神经干由许多神经纤维组成。其动作电位是以膜外记录方式记录到的复合动作电位 如果两个引导电极置于兴奋性正常的神经干表面,兴奋波先后通过两个电极处,便引导出两个方向相反的电位波形,称双相动作电位 实验原理 方法和步骤 制备坐骨神经干标本 1.破坏脑和脊髓 2.剪除躯干上部及内脏 3.剥去皮肤(手及用过的器械用自来水冲洗) 4.分离两腿 5.制坐骨神经干标本 连接实验装置 观察项目 引导神经干双相动作电位 观察刺激强度对动作电位幅度的影响 找出阈强度和最大刺激强度 测量动作电位传导速度: v =s/t 观察单相动作电位和不应期 测定不应期条件:双刺激(串数2);间隔↓ 动作电位传导速度的测定Measurement of Conduction Velocity of AP - S Δt 输入通道 R1- Rr1+ R2- R2+ + ?传导速度测定??υ=? SAC Δt 刺激器 注意事项 抓取蟾蜍时,禁忌挤压两侧耳部的毒腺,禁止将蟾蜍头部对着自己及他人,以免其眼后线处分泌毒液射入眼中。 剥皮后须将手及用过的器械洗净,再进行下一步操作 用玻璃分针去除神经周围的结缔组织,避免用力牵拉神经或用金属器械夹捏神经,以防神经损伤。 标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使神经兴奋性稳定。实验过程中也需经常用任氏液湿润标本,以防影响标本的机能。 注意事项 避免用力牵拉神经或用金属器械夹捏神经 神经干要有足够的长度,制成后须放在任氏液(Ringer’s solution)中浸泡数分钟 要将神经干向中端(中枢端)置于靠近刺激电极一侧 (why?) 标本应平直地放在电极上与电极密切接触,保持湿润,但要用滤纸吸去过多的任氏液,以防短路
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