甘薯花青素提取与测定方法2.doc

甘薯花青素测定方法 一 柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液法 Ph3.0的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液配制 1）0.1mol/L的柠檬酸标准溶液的配制 柠檬酸21.014g精确至0.001g，用去离子水经充分溶解后，以1000ml的容量瓶定容。待用。 2）0.2mol/L磷酸氢二钠标准溶液的配制 称取磷酸氢二钠71.628精确至0.001g，去离子水充分溶解后，以1000ml的容量瓶定容。待用。 将以上两种溶液按柠檬酸：磷酸氢二钠=15.89：4.11（毫升数）的比例进行混合配制成Ph3.0的缓冲液，用Ph试纸或Ph计准确确定Ph，配制量以检测所需用量为准，待用。 甘薯样品溶液的配制 将甘薯去皮切丁，称取2g薯丁于干净研钵中加入少量缓冲液研磨至匀浆（可加入适当石英砂），将匀浆完全转移进50ml离心管中，加入柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液至刻度线35-40ml左右，于60℃提取2h，冷却后移入100ml容量瓶以缓冲液定容，避光静置2h，期间多次颠倒混匀。混匀后取适量移入离心管，4500-5000r，离心3-5min。取上清液，以缓冲液为空白对照，光程为1cm，在分光光度计上于525nm处比色。 计算公式 C=1/958*V/100*1/m*ABS*100000 C:花青素含量，单位为mg/100g(鲜薯) 958:ABS转换为质量体积比的经验系数 V:定容体积ml m:样品质量 ABS:光度计读出的吸光度值 100000:单位转换系数 花青素提取液配方 序号 柠檬酸 磷酸氢二钠 加水定容到V（L） 序号 柠檬酸 磷酸氢二钠 加水定容到V（L） 1 16.6956 14.7196 1 21 350.6076 309.1116 21 2 33.3912 29.4392 2 22 367.3032 323.8312 22 3 50.0877 44.1588 3 23 383.9988 338.5508 23 4 66.7836 58.8784 4 24 400.6944 353.2704 24 5 83.4795 73.5980 5 25 417.3900 367.9900 25 6 100.1754 88.3176 6 26 434.0856 382.7096 26 7 116.8713 103.0372 7 27 450.7812 397.4292 27 8 133.5672 117.7568 8 28 467.4768 412.1488 28 9 150.2631 132.4764 9 29 484.1724 426.8684 29 10 166.9590 147.1960 10 30 500.8680 441.5880 30 11 183.6549 161.9156 11 31 517.5636 456.3076 31 12 200.3508 176.6352 12 32 534.2592 471.0272 32 13 217.0467 191.3548 13 33 550.9548 485.7468 33 14 233.7426 206.0744 14 34 567.6504 500.4664 34 15 250.4385 220.7940 15 35 584.3460 515.1860 35 16 267.1344 235.5136 16 36 601.0416 529.9056 36 17 283.8303 250.2332 17 37 617.7372 544.6252 37 18 300.5262 264.9528 18 38 634.4328 559.3448 38 19 317.2221 279.6724 19 39 651.1284 574.0644 39 20 333.9180 294.3920 20 40 667.8240 588.7840 40 注：PH=3，不用调。